| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 序言 | 第12-17页 |
| 参考文献 | 第15-17页 |
| 第一部分 霍乱毒素A、B 亚单位的克隆表达 | 第17-33页 |
| 1 实验材料 | 第17-19页 |
| ·菌株、细胞和质粒 | 第17-18页 |
| ·工具酶和主要生化试剂 | 第18页 |
| ·试剂盒和抗体 | 第18页 |
| ·培养基和实验用溶液 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| 2 实验方法 | 第19-26页 |
| ·重组质粒pET30a-CTA、pET30a-CTB 的构建 | 第19-22页 |
| ·BL21(DE3)中蛋白大量表达的诱导方法及表达产物的初步分析 | 第22-26页 |
| ·CTB 蛋白的GM1 结合能力检测 | 第26页 |
| 3 实验结果 | 第26-30页 |
| ·重组质粒的PCR、酶切鉴定与测序 | 第26-27页 |
| ·pET-30a-CTA /CTB 重组质粒的诱导表达及鉴定 | 第27-30页 |
| 4. 讨论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-33页 |
| 第二部分 CTA/CTB 蛋白配伍TRIVN DNA 疫苗的佐剂效果评价 | 第33-41页 |
| 1. 实验材料 | 第34页 |
| ·质粒 | 第34页 |
| ·蛋白 | 第34页 |
| 2. 实验方法 | 第34-36页 |
| ·动物免疫 | 第34-35页 |
| ·免疫小鼠脾淋巴细胞的收集与处理 | 第35页 |
| ·细胞免疫反应的检测 | 第35-36页 |
| ·统计学方法 | 第36页 |
| 3 实验结果 | 第36-37页 |
| ·ELISPOT 检测免疫后小鼠T 细胞反应 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-41页 |
| 第三部分 CTA/CTB 融合TRIVN DNA 疫苗的佐剂效果评价 | 第41-52页 |
| 1 实验材料 | 第42页 |
| ·菌株、细胞和质粒 | 第42页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第42页 |
| 2 关键实验方法 | 第42-44页 |
| ·融合DNA 疫苗的构建 | 第42-43页 |
| ·293T 细胞的转染 | 第43页 |
| ·Western-Blot 方法验证蛋白表达 | 第43-44页 |
| ·动物免疫 | 第44页 |
| ·免疫小鼠脾淋巴细胞的收集与处理 | 第44页 |
| ·细胞免疫反应的检测 | 第44页 |
| ·统计学方法 | 第44页 |
| 3 实验结果 | 第44-49页 |
| ·重组DNA 质粒pSVAE-TRIVN-CTA、pSVAE-TRIVN-CTB 的构建与鉴定 | 第44-46页 |
| ·重组DNA 质粒pSVAE-TRIVN-CTA、pSVAE-TRIVN-CTB 的体外表达验证 | 第46-47页 |
| ·不同重组TRIVN DNA 疫苗免疫原性的比较 | 第47-49页 |
| 4. 讨论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 文献综述： 霍乱毒素佐剂应用研究进展 | 第53-61页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文 | 第61-62页 |
| 本研究所获基金资助 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 缩略词表 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
