| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 BURP蛋白家族的简介 | 第11-12页 |
| 1.2 BURP蛋白家族在植物中的功能以及作用机制 | 第12-14页 |
| 1.3 植物细胞壁在抗铜胁迫中的作用 | 第14-16页 |
| 1.4 研究意义 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第17页 |
| 2.1.2 所用菌种、载体 | 第17-19页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.1.4 所用试剂及培养基 | 第20-22页 |
| 2.1.5 引物 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-38页 |
| 2.2.0 启动子分析 | 第23页 |
| 2.2.1 AtRD22半定量PCR分析 | 第23-25页 |
| 2.2.2 启动子片段的获得及转基因载体的构建 | 第25-29页 |
| 2.2.3 AtRD22基因片段的获得及转基因载体的构建 | 第29-30页 |
| 2.2.4 转基因植物的获得 | 第30-32页 |
| 2.2.5 转基因植株的表型分析 | 第32-33页 |
| 2.2.6 植株铜含量的测定 | 第33-34页 |
| 2.2.7 植物铜吸收和分布观察 | 第34页 |
| 2.2.8 组织特异性表达GUS检测 | 第34页 |
| 2.2.9 拟南芥At RD22蛋白的诱导表达纯化及pull down实验 | 第34-38页 |
| 第三章 结果分析 | 第38-61页 |
| 3.1 铜胁迫响应表达情况 | 第38-45页 |
| 3.1.1 启动子分析 | 第38页 |
| 3.1.2 铜胁迫下的表达分析 | 第38-40页 |
| 3.1.3 组织特异性表达分析 | 第40-42页 |
| 3.1.4 AtRD22启动子的克隆及基因表达分析 | 第42-43页 |
| 3.1.5 转RDpro基因植株的筛选及分子鉴定 | 第43页 |
| 3.1.6 植株特异性表达GUS鉴定 | 第43-45页 |
| 3.2 AtRD22的功能分析 | 第45-52页 |
| 3.2.1 载体构建及转基因植株鉴定 | 第45-49页 |
| 3.2.2 铜胁迫下萌发生长 | 第49-51页 |
| 3.2.3 基因表达对铜吸收和分布的影响 | 第51-52页 |
| 3.3 AtRD22的作用机制初探 | 第52-61页 |
| 3.3.1 表达载体的构建及蛋白表达纯化 | 第52-54页 |
| 3.3.2 AtRD22相互作用蛋白的分析与鉴定 | 第54-61页 |
| 第四章 讨论 | 第61-66页 |
| 4.1 AtRD22的表达具有组织特异性 | 第61-62页 |
| 4.2 AtRD22的表达受铜胁迫的调控 | 第62-63页 |
| 4.3 BURP结构域是AtRD22参与植物抗铜胁迫的主要功能域 | 第63-64页 |
| 4.4 AtRD22可能与其它蛋白一起调控植物对Cu~(2+)胁迫的抗性 | 第64-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 附录 | 第70-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第94页 |
