中文摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8页 |
1 前言 | 第9-21页 |
1.1 志贺氏菌概述 | 第9页 |
1.2 志贺氏菌的病原学特性 | 第9-11页 |
1.2.1 志贺氏菌的病原学特征 | 第9-10页 |
1.2.2 志贺氏菌生化特性 | 第10-11页 |
1.3 志贺氏菌致病特点 | 第11-13页 |
1.3.1 人志贺氏菌病病变特点 | 第11-12页 |
1.3.2 其他宿主志贺氏菌病变特点 | 第12页 |
1.3.3 侵染机制 | 第12-13页 |
1.3.4 志贺氏菌分子发病机制 | 第13页 |
1.4 诊断技术 | 第13-16页 |
1.4.1 细菌分离鉴定 | 第14页 |
1.4.2 生化鉴定 | 第14-15页 |
1.4.3 免疫学检测方法 | 第15-16页 |
1.4.3.1 凝集试验 | 第15-16页 |
1.4.3.2 金黄色葡萄球菌A蛋白(StaphyIoca I Protein A)法 | 第16页 |
1.4.3.3 酶联免疫吸附试验 | 第16页 |
1.5 分子生物学检测 | 第16-19页 |
1.5.1 环介导等温扩增技术 | 第17-18页 |
1.5.2 随机引物扩增法 | 第18页 |
1.5.3 PCR技术 | 第18页 |
1.5.4 PCR与 16S rRNA序列分析 | 第18-19页 |
1.6 防治 | 第19页 |
1.6.1 志贺氏菌的预防 | 第19页 |
1.6.2 治疗 | 第19页 |
1.6.2.1 药物治疗 | 第19页 |
1.6.2.2 分子生物学防治 | 第19页 |
1.7 本研究的目的意义 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-29页 |
2.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.1 病料来源 | 第21页 |
2.1.2 供试药物及培养基 | 第21页 |
2.1.3 分子生物学试剂 | 第21页 |
2.1.4 电泳缓冲液 | 第21页 |
2.1.5 琼脂糖凝胶的配制 | 第21页 |
2.1.6 实验仪器设备 | 第21-22页 |
2.1.7 引物的设计及合成 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-29页 |
2.2.1 细菌的分离培养 | 第22页 |
2.2.2 革兰氏染色及镜检 | 第22页 |
2.2.3 生化试验鉴定 | 第22页 |
2.2.4 模版DNA的制备 | 第22-23页 |
2.2.5 PCR扩增目的片段 | 第23页 |
2.2.6 PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第23-24页 |
2.2.7 PCR产物的回收 | 第24-25页 |
2.2.8 目的片段与克隆载体的连接 | 第25页 |
2.2.9 用CaCl_2法制备大肠杆菌感受态 | 第25页 |
2.2.10 重组质粒的转化 | 第25-26页 |
2.2.11 质粒的提取 | 第26-27页 |
2.2.12 重组质粒的酶切鉴定 | 第27页 |
2.2.13 阳性克隆序列测定 | 第27页 |
2.2.14 通药敏纸片试验 | 第27-29页 |
3 结果与分析 | 第29-33页 |
3.1 贺氏菌形态鉴定 | 第29页 |
3.2 生化实验鉴定结果 | 第29-30页 |
3.3 PCR扩增结果 | 第30页 |
3.4 重组质粒鉴定结果 | 第30-31页 |
3.5 16S rDNA测序结果 | 第31页 |
3.6 普通药敏纸片试验结果 | 第31-33页 |
4 讨论 | 第33-35页 |
5 结论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-40页 |
附录 | 第40-41页 |
致谢 | 第41页 |