提要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
引言 | 第9-12页 |
第一部分 罗勒多糖及其联合紫杉醇对A549细胞株增殖的影响 | 第12-18页 |
一、实验技术路线 | 第12页 |
二、实验材料 | 第12-13页 |
(一)细胞株 | 第12页 |
(二)样品与试剂 | 第12-13页 |
(三)主要仪器 | 第13页 |
三、实验方法 | 第13-15页 |
(一)试剂的配制 | 第13页 |
(二)样品液的制备 | 第13-14页 |
(三)细胞培养 | 第14页 |
(四)罗勒多糖及其联合紫杉醇对A549细胞株的形态的影响 | 第14-15页 |
(五)MTT法测紫杉醇联合罗勒多糖不同剂量在不同时间对A549细胞增殖的影响 | 第15页 |
四、统计学分析 | 第15页 |
五、实验结果 | 第15-17页 |
(一)紫杉醇联合罗勒多糖不同剂量、时间对A549细胞增殖的影响 | 第15-16页 |
(二)罗勒多糖及其联合紫杉醇用药对A549细胞株的形态的影响 | 第16-17页 |
六、小结 | 第17-18页 |
第二部分 罗勒多糖及其联合紫杉醇对A549细胞周期及细胞凋亡的影响 | 第18-28页 |
一、实验技术路线 | 第18页 |
二、实验材料 | 第18-19页 |
(一)细胞株 | 第18页 |
(二)样品与试剂 | 第18-19页 |
(三)主要仪器 | 第19页 |
三、实验方法 | 第19-22页 |
(一)试剂的配制 | 第19-20页 |
(二)样品液的制备 | 第20页 |
(三)Hoechst 33342/PI双染色观察细胞形态 | 第20-21页 |
(四)PI染色流式细胞术检测细胞周期 | 第21页 |
(五)JC-1 染色激光扫描共焦显微镜检测线粒体膜电位 | 第21-22页 |
(六)Fluo-3/AM染色激光扫描共聚焦显微镜检测钙离子浓度 | 第22页 |
四、统计学分析 | 第22页 |
五、实验结果 | 第22-26页 |
(一)Hoechst 33342/PI双染色观察细胞形态结果 | 第22-23页 |
(二)PI染色流式细胞术检测细胞周期 | 第23-24页 |
(三)JC-1 染色激光扫描共焦显微镜检测及流式细胞术检测线粒体膜电位结果 | 第24-26页 |
(四)Fluo-3/AM染色激光扫描共焦显微镜检测钙离子浓度结果 | 第26页 |
六、小结 | 第26-28页 |
第三部分 罗勒多糖联合紫杉醇对A549细胞凋亡基因Bax、Bcl-2 以及耐药基因GST-π和MDR1基因表达的影响 | 第28-35页 |
一、实验技术路线 | 第28页 |
二、实验材料 | 第28-30页 |
(一)细胞株 | 第28页 |
(二)样品与试剂 | 第28-29页 |
(三)主要仪器 | 第29-30页 |
三、实验方法 | 第30-32页 |
(一)样品液的制备 | 第30页 |
(二)RNA的提取 | 第30-31页 |
(三)RT反应 | 第31页 |
(四)Real Time PCR反应 | 第31-32页 |
四、统计学分析 | 第32页 |
五、实验结果 | 第32-34页 |
(一)罗勒多糖对A549细胞Bax/Bcl-2/GST-π/MDR1 mRNA的表达水平的影响 | 第32页 |
(二)A549细胞内Bax和Bcl-2、GST-π 和MDR1 mRNA表达情况 | 第32-34页 |
六、小结 | 第34-35页 |
讨论 | 第35-40页 |
一、中医药抗肿瘤国内外研究进展 | 第35-37页 |
二、罗勒多糖联合紫杉醇对A549细胞株形态学观察 | 第37页 |
三、罗勒多糖及其联合紫杉醇对A549细胞株增殖的影响 | 第37页 |
四、流式细胞术检测细胞的周期分布及线粒体膜电位及细胞内Ca~(2+)浓度的变化 | 第37-38页 |
五、实时荧光定量PCR检测Bax和Bcl-2、GST-π 和MDR1 mRNA表达量的变化 | 第38-40页 |
结语 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
附录一 英文缩写与中文名词对照 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
论文著作 | 第49页 |