| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 植物的成花诱导途径 | 第9-13页 |
| 1.1.1 光周期途径 | 第9-10页 |
| 1.1.2 自主途径 | 第10页 |
| 1.1.3 糖类（或蔗糖）途径 | 第10页 |
| 1.1.4 赤霉素途径 | 第10-11页 |
| 1.1.5 春化作用 | 第11-13页 |
| 1.1.5.1 普通小麦春化发育特性分类 | 第11-12页 |
| 1.1.5.2 春化作用分子机制 | 第12-13页 |
| 1.1.6 开花整合子 | 第13页 |
| 1.2 VIGS的研究进展及应用 | 第13-17页 |
| 1.2.1 VIGS的建立与发展 | 第13-14页 |
| 1.2.2 VIGS的机制 | 第14-16页 |
| 1.2.3 VIGS的优缺点 | 第16-17页 |
| 2 引言 | 第17-18页 |
| 3 材料与方法 | 第18-32页 |
| 3.1 试验材料 | 第18-21页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 3.1.2 菌株与载体 | 第18页 |
| 3.1.3 分子生物学试剂及仪器 | 第18页 |
| 3.1.4 PCR引物 | 第18-20页 |
| 3.1.5 细菌培养基的配制 | 第20-21页 |
| 3.2 试验方法 | 第21-26页 |
| 3.2.1 材料处理 | 第21-22页 |
| 3.2.1.1 基因克隆及荧光定量材料的处理 | 第21页 |
| 3.2.1.2 BSMV用材料的处理 | 第21页 |
| 3.2.1.3 CL13519过表达用拟南芥材料的处理 | 第21-22页 |
| 3.2.2 RNA的提取及检测 | 第22-23页 |
| 3.2.2.1 RNA的提取和纯化 | 第22页 |
| 3.2.2.2 c DNA第一链的合成 | 第22-23页 |
| 3.2.3 春化相关基因的克隆及荧光定量PCR分析 | 第23-26页 |
| 3.2.3.1 目的基因的克隆 | 第23-25页 |
| 3.2.3.2 目的基因的表达特性分析 | 第25-26页 |
| 3.3 BSMV重组载体的构建、接种及VIGS的检测 | 第26-29页 |
| 3.3.1 目的片段的克隆 | 第26页 |
| 3.3.2 目的片段的酶切 | 第26-27页 |
| 3.3.3 BSMV重组载体的构建 | 第27页 |
| 3.3.4 BSMV重组载体的线性化 | 第27-28页 |
| 3.3.5 BSMV体外转录 | 第28页 |
| 3.3.6 BSMV接种液的制备及接种 | 第28页 |
| 3.3.7 VIGS的检测 | 第28-29页 |
| 3.3.7.1 转录水平的检测 | 第28页 |
| 3.3.7.2 生理指标的检测 | 第28-29页 |
| 3.4 CL13519过表达载体的构建及其遗传转化 | 第29-32页 |
| 3.4.1 CL13519过表达载体的构建 | 第29页 |
| 3.4.2 过表达载体在农杆菌中的转化 | 第29-30页 |
| 3.4.3 农杆菌介导的拟南芥的花序侵染 | 第30页 |
| 3.4.4 转基因植株的鉴定 | 第30-32页 |
| 4 结果分析 | 第32-46页 |
| 4.1 目的基因的克隆及序列分析 | 第32-36页 |
| 4.1.1 CL13519的克隆及序列分析 | 第32-34页 |
| 4.1.2 Unigene1312的克隆及序列分析 | 第34页 |
| 4.1.3 Unigene4460的克隆及序列分析 | 第34-35页 |
| 4.1.4Unigene20的克隆及序列分析 | 第35-36页 |
| 4.2 目的基因的表达特性分析 | 第36-38页 |
| 4.2.1 CL13519的荧光定量PCR | 第36页 |
| 4.2.2 Unigene 1312 的荧光定量PCR | 第36-37页 |
| 4.2.3 Unigene4460的荧光定量PCR | 第37页 |
| 4.2.4 Unigene20的荧光定量PCR | 第37-38页 |
| 4.3 BSMV-VIGS载体构建、接种及表型观察 | 第38-44页 |
| 4.3.1 目的片段的克隆 | 第38页 |
| 4.3.2 目的片段的酶切 | 第38页 |
| 4.3.3 BSMV-γ重组载体的酶切验证 | 第38-39页 |
| 4.3.4 BSMV载体的线性化 | 第39页 |
| 4.3.5 BSMV载体的体外转录 | 第39-40页 |
| 4.3.6 病毒接种后的表型观察 | 第40-41页 |
| 4.3.7 目的基因转录水平表达检测 | 第41-42页 |
| 4.3.8 BSMV-VIGS植株叶绿素含量的测定结果分析 | 第42-43页 |
| 4.3.9 BSMV-VIGS植株的幼穗分化进程分析 | 第43-44页 |
| 4.4 CL13519的过表达分析 | 第44-46页 |
| 4.4.1 CL13519过表达载体的构建 | 第44页 |
| 4.4.2 转基因T1代植株PCR鉴定 | 第44-45页 |
| 4.4.3 CL13519过表达植株的表型观察 | 第45-46页 |
| 5 结论与讨论 | 第46-49页 |
| 5.1 目的基因序列分析 | 第46-47页 |
| 5.2 目的基因的表达特性分析 | 第47页 |
| 5.3 初步的基因功能验证 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| ABSTRACT | 第58-59页 |
