| 摘要 | 第3-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一部分 天麻对神经干细胞的影响 | 第15-79页 |
| 第一章 引言 | 第15-28页 |
| 第一节 天麻 | 第15-20页 |
| 1. 天麻概述 | 第15-16页 |
| 2. 天麻的药理作用 | 第16-20页 |
| 第二节 转录组测序 | 第20-27页 |
| 1. 基因表达与高通量测序 | 第20页 |
| 2．转录组测序 | 第20-27页 |
| 第三节 研究目的及意义 | 第27-28页 |
| 第二章 材料和方法 | 第28-41页 |
| 第一节 材料 | 第28-31页 |
| 1.主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.主要试剂及耗材 | 第29页 |
| 3.主要抗体及来源 | 第29-30页 |
| 4. 实验动物及天麻来源 | 第30-31页 |
| 第二节 实验方法 | 第31-35页 |
| 1．天麻提取物制备 | 第31页 |
| 2．天麻提取物中天麻素含量测定 | 第31页 |
| 3．细胞培养 | 第31-33页 |
| 4．天麻对CoCl2引起的缺氧神经干细胞的保护作用 | 第33-35页 |
| 第三节 基于RNA-seq测序的基因表达差异分析 | 第35-41页 |
| 1．用于高通量测序的RNA的提取 | 第35页 |
| 2．高通量测序 | 第35-36页 |
| 3.RNA-Seq数据处理与分析方法 | 第36-41页 |
| 第三章 结果与分析 | 第41-69页 |
| 第一节 天麻对神经干细胞增殖的影响 | 第41-47页 |
| 1．天麻质量评估 | 第41-42页 |
| 2．天麻对神经干细胞增殖的影响 | 第42-47页 |
| 第二节 基于RNA-Seq的天麻对神经干细胞的权重基因共表达网络分析 | 第47-69页 |
| 1．RNA-Seq测序数据预处理 | 第47页 |
| 2．读段定位结果 | 第47-48页 |
| 3．定位读段与转录物组装 | 第48页 |
| 4. 权重基因共表达网络的建立 | 第48-69页 |
| 第四章 讨论 | 第69-73页 |
| 1. 天麻促进神经干细胞增殖 | 第69页 |
| 2. WGCNA在天麻作用神经干细胞中的模块研究 | 第69-71页 |
| 3. 天麻诱导的关键基因 | 第71页 |
| 4. 天麻在成体神经干细胞的作用 | 第71-72页 |
| 5. 后续研究方向 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 第二部分 小分子RNA对神经干细胞增殖分化的影响——MICRORNAS抑制脆性X综合征基因FMR1的表达及调节小鼠胚胎神经干细胞的增殖和分化 | 第79-181页 |
| 第一章 绪论 | 第79-100页 |
| 第一节 非编码RNA | 第79-82页 |
| 第二节 microRNA的概述 | 第82-96页 |
| 1. miRNA的研究进展 | 第82-86页 |
| 2. 干细胞与microRNA的调控作用 | 第86-92页 |
| 3. miRNA研究的生物信息学方法 | 第92-96页 |
| 第三节 脆性X综合征及FMR1基因 | 第96-99页 |
| 1. FXS的分子遗传学机制 | 第96-97页 |
| 2. FMRP蛋白的结构和功能 | 第97-98页 |
| 3. FXS的神经机制 | 第98-99页 |
| 第四节 本研究的目的和意义 | 第99-100页 |
| 第二章 材料和方法 | 第100-128页 |
| 第一节 材料 | 第100-105页 |
| 1. 主要仪器设备 | 第100-101页 |
| 2. 主要试剂及耗材 | 第101-103页 |
| 3. 主要抗体及来源 | 第103-104页 |
| 4. 实验动物及自有质粒 | 第104-105页 |
| 第二节 技术路线 | 第105-106页 |
| 第三节 计算机方法 | 第106-107页 |
| 第四节 实验方法 | 第107-128页 |
| 1. 细胞培养 | 第107-108页 |
| 2. 质粒构建 | 第108-116页 |
| 3. 双荧光素酶报告分析（Luciferase assay） | 第116-117页 |
| 4. 表达shRNA的慢病毒颗粒的包装 | 第117-118页 |
| 5．sh RNA的功能分析 | 第118-124页 |
| 6．miRNA对神经干细胞命运的影响分析 | 第124-128页 |
| 第三章 结果与分析 | 第128-160页 |
| 第一节 生物信息学分析 | 第128-134页 |
| 1. 在线软件对靶向小鼠m FMR1基因 3′ UTR的miRNA的预测 | 第128-129页 |
| 2. 组织表达特异性对备选miRNA的筛选 | 第129-131页 |
| 3. miRNA与靶基因结合位点的预测 | 第131-134页 |
| 第二节 靶向mFMR1-3′ UTR的miRNA验证 | 第134-143页 |
| 1. 双荧光素酶报告分析 | 第134-137页 |
| 2. 上调miRNA对神经干细胞mFMR1基因表达的影响 | 第137-143页 |
| 第三节 miRNA介导m FMRP调节神经干细胞的命运 | 第143-151页 |
| 1. miR-130b介导mFMRP调节神经干细胞的命运 | 第143-148页 |
| 2. miR-124介导mFMRP调节神经干细胞的命运 | 第148-151页 |
| 第四节 miRNA介导m FMRP调节神经干细胞的基因表达水平 | 第151-160页 |
| 1. miR-130b介导mFMRP调节神经干细胞基因表达水平 | 第151-156页 |
| 2. miR-124介导mFMRP调节神经干细胞基因表达水平 | 第156-160页 |
| 第四章 讨论 | 第160-168页 |
| 1. 生物信息学预测的可行性 | 第160-161页 |
| 2. miR-130b和miR-124在神经干细胞中抑制FXS综合征关键基因FMR1 | 第161-163页 |
| 3. miR-130b和miR-124抑制FMRP的表达影响神经干细胞的命运 | 第163-164页 |
| 4. miR-130b和miR-124抑制FMRP的表达影响神经干细胞命运的机制探讨 | 第164-166页 |
| 5. microRNA与FXS综合征的治疗 | 第166-167页 |
| 6. miRNA靶向药物的应用前景及展望 | 第167-168页 |
| 参考文献 | 第168-181页 |
| 致谢 | 第181-182页 |
| 攻读博士期间的研究成果 | 第182页 |
