| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 植物根际促生菌的概念 | 第12页 |
| 1.2 植物根际促生菌的种类 | 第12-13页 |
| 1.3 禾本科植物的根际固氮菌 | 第13页 |
| 1.4 假单胞菌属 | 第13-14页 |
| 1.5 假单胞菌对植物促生作用的机制 | 第14-16页 |
| 1.5.1 嗜铁素作用 | 第14-15页 |
| 1.5.2 抗生作用 | 第15页 |
| 1.5.3 细菌的定殖与竞争 | 第15-16页 |
| 1.5.4 消除植物根际土壤的有毒物质 | 第16页 |
| 1.5.5 次生抗性代谢产物 | 第16页 |
| 1.5.6 诱导系统抗性作用 | 第16页 |
| 1.6 假单胞菌的应用及展望 | 第16-17页 |
| 1.7 BIOLOG方法 | 第17-18页 |
| 1.8 本研究的研究内容及意义 | 第18-19页 |
| 1.9 技术路线 | 第19-20页 |
| 2 甘蔗根际土壤假单胞菌的分离和纯化 | 第20-23页 |
| 2.1 材料和方法 | 第20-21页 |
| 2.1.1 土壤的采集 | 第20页 |
| 2.1.2 培养基 | 第20页 |
| 2.1.3 甘蔗根际固氮细菌的分离 | 第20-21页 |
| 2.1.4 甘蔗根际固氮细菌的纯化与保存 | 第21页 |
| 2.2 结果与分析 | 第21页 |
| 2.2.1 甘蔗根际细菌的分离和纯化 | 第21页 |
| 2.3 小结 | 第21-23页 |
| 3 甘蔗根际促生菌的筛选和鉴定 | 第23-38页 |
| 3.1 材料与方法 | 第23-28页 |
| 3.1.1 培养基 | 第23页 |
| 3.1.2 固氮酶活性的测定 | 第23-24页 |
| 3.1.3 平板法检测细菌溶解磷酸钙特性 | 第24页 |
| 3.1.4 细菌产嗜铁素测定 | 第24页 |
| 3.1.5 比色法定量检测细菌分泌IAA | 第24页 |
| 3.1.6 ACC脱氨酶活性检测 | 第24页 |
| 3.1.7 细菌菌株产HCN的测定 | 第24页 |
| 3.1.8 16S rRNA基因序列的扩增与测定 | 第24-25页 |
| 3.1.9 假单胞菌的系统发育分析 | 第25页 |
| 3.1.10 假单胞菌与真菌间的拮抗作用 | 第25页 |
| 3.1.11 固氮酶nifH基因的检测 | 第25-26页 |
| 3.1.12 假单胞菌抗生素基因的检测 | 第26-28页 |
| 3.2 结果与分析 | 第28-35页 |
| 3.2.1 假单胞菌的筛选和鉴定结果 | 第28-30页 |
| 3.2.2 假单胞菌系统进化树分析 | 第30-31页 |
| 3.2.3 假单胞的PGPR特性 | 第31-34页 |
| 3.2.4 假单胞菌nifH基因检测结果 | 第34页 |
| 3.2.5 假单胞菌抗生素基因检测结果 | 第34-35页 |
| 3.3 讨论 | 第35-38页 |
| 4 假单胞菌属Rep-PCR指纹图谱分析 | 第38-45页 |
| 4.1 Rep-PCR扩增反应 | 第38-39页 |
| 4.2 Rep-PCR聚类分析 | 第39-40页 |
| 4.3 结果与分析 | 第40-44页 |
| 4.3.1 假单胞菌的BOX-PCR基因指纹图谱分析 | 第40-41页 |
| 4.3.2 假单胞菌的REP-PCR基因指纹图谱分析 | 第41-42页 |
| 4.3.3 假单胞菌的ERIC-PCR基因指纹图谱分析 | 第42-44页 |
| 4.4 小结 | 第44-45页 |
| 5 BIOLOG表型微平板检测试验 | 第45-48页 |
| 5.1 BIOLOG试验方法 | 第45页 |
| 5.2 结果与分析 | 第45-47页 |
| 5.2.1 假单胞菌CY4和CN11碳源利用的BIOLOG分析 | 第45-46页 |
| 5.2.2 假单胞菌CY4和CN11代谢多样性主成分分析 | 第46-47页 |
| 5.3 小结 | 第47-48页 |
| 6 CY4和CN11在甘蔗组培苗中的定殖 | 第48-53页 |
| 6.1 材料和方法 | 第48-49页 |
| 6.1.1 材料 | 第48页 |
| 6.1.2 双亲接合法向CY4和CN11导入pPROBE-pTetr-OT质粒 | 第48页 |
| 6.1.3 CY4和CN11接种甘蔗组培苗的方法 | 第48-49页 |
| 6.1.4 荧光显微镜检测CY4和CN11在甘蔗组培苗中的定殖 | 第49页 |
| 6.2 结果与分析 | 第49-51页 |
| 6.2.1 GFP标记CY4和CN11 | 第49页 |
| 6.2.2 CY4和CN11在甘蔗组培苗根、茎和叶中的定殖 | 第49-51页 |
| 6.3 小结 | 第51-53页 |
| 7 桶栽试验 | 第53-69页 |
| 7.1 试验材料 | 第53页 |
| 7.1.1 植物材料 | 第53页 |
| 7.1.2 供试菌株 | 第53页 |
| 7.1.3 试验土壤 | 第53页 |
| 7.1.4 试验用桶 | 第53页 |
| 7.2 试验方法 | 第53-56页 |
| 7.2.1 接种液的准备 | 第53-54页 |
| 7.2.2 甘蔗育苗移栽 | 第54页 |
| 7.2.3 甘蔗株高的测定 | 第54页 |
| 7.2.4 不同处理甘蔗鲜重的测定 | 第54页 |
| 7.2.5 甘蔗过SOD、POD和CAT活性的测定 | 第54页 |
| 7.2.6 甘蔗内源激素含量的测定 | 第54页 |
| 7.2.7 甘蔗β-1,3葡聚糖酶和几丁质酶含量的测定 | 第54-55页 |
| 7.2.8 甘蔗RNA的提取及逆转录合成cDNA | 第55页 |
| 7.2.9 甘蔗接菌后nifH基因的实时荧光定量表达 | 第55页 |
| 7.2.10 CY4和CN11接种桶栽甘蔗的~(15)N同位素稀释试验 | 第55-56页 |
| 7.3 结果与分析 | 第56-67页 |
| 7.3.1 接种假单胞菌对两个品种甘蔗不同时期株高、鲜重的影响 | 第56-58页 |
| 7.3.2 接种假单胞菌对两个品种甘蔗不同时期抗氧化物酶活的影响 | 第58-60页 |
| 7.3.3 接种假单胞菌对两个品种甘蔗不同时期植物内源激素的影响 | 第60-62页 |
| 7.3.4 接种假单胞菌对两个品种甘蔗不同时期β-1,3葡聚糖酶活性和几丁质酶活性的影响 | 第62-64页 |
| 7.3.5 接种假单胞菌后甘蔗固氮基因的表达 | 第64页 |
| 7.3.6 接种假单胞菌对两个品种甘蔗全氮含量、~(15)N原子百分超和固氮百分率的影响 | 第64-67页 |
| 7.4 讨论 | 第67-69页 |
| 8 结论 | 第69-70页 |
| 8.1 全文总结 | 第69页 |
| 8.2 论文创新点 | 第69页 |
| 8.3 问题与展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第77页 |
