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黄河鲤卵巢发育早期相关基因与信号通路的鉴定和作用研究

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
1 前言第14-30页
    1.1 哺乳类动物性别决定第14-16页
        1.1.1 Sry基因的结构和功能第15页
        1.1.2 Sry的进化第15-16页
        1.1.3 Sry基因的下游基因第16页
    1.2 哺乳类动物卵巢的分化发育第16-22页
        1.2.1 哺乳类动物卵巢的结构及分化发育第16-18页
        1.2.2 卵巢早期发育的分子机理第18-22页
    1.3 鱼类性别决定第22-25页
        1.3.1 鱼类性别决定基因第22-23页
        1.3.2 影响鱼类性别决定的环境因子第23-25页
    1.4 鱼类卵巢分化发育的机理第25-28页
        1.4.1 鱼类卵巢的分化发育第25页
        1.4.2 鱼类卵巢发育相关的分子机理第25-28页
    1.5 本研究的目的和意义第28-30页
2 材料与方法第30-44页
    2.1 实验材料第30-34页
        2.1.1 实验动物第30页
        2.1.2 实验仪器设备第30页
        2.1.3 常用试剂与耗材第30-31页
        2.1.4 常用溶液配方第31-33页
        2.1.5 PCR扩增引物第33页
        2.1.6 生物信息学分析软件和在线网址第33-34页
    2.2 研究方法第34-44页
        2.2.1 黄河鲤卵巢不同发育时期的组织学观察第34页
        2.2.2 黄河鲤性腺分化早期相关基因的表达第34-35页
        2.2.3 黄河鲤卵巢发育关键时期的转录组测序及信息分析第35-36页
        2.2.4 卵巢分化发育密切相关DEGs结构和表达模式研究第36-41页
        2.2.5 信号通路对黄河鲤卵巢分化发育的影响第41-42页
        2.2.6 TPT对黄河鲤卵巢分化发育的影响第42-44页
3 结果第44-120页
    3.1 黄河鲤卵巢发育的组织学特征第44-45页
    3.2 黄河鲤性腺分化关键时间的确定第45-47页
        3.2.1 性腺分化早期相关基因的表达趋势第45页
        3.2.2 雄性性别分化相关基因的表达第45页
        3.2.3 雌性性别分化相关基因的表达第45-47页
    3.3 黄河鲤卵巢发育关键时期转录组的比较与分析第47-57页
        3.3.1 黄河鲤卵巢发育关键时期的组织学特征第47-48页
        3.3.2 卵巢转录物组信息分析第48-49页
        3.3.3 不同发育时期基因的表达分析第49-50页
        3.3.4 不同发育时期基因和DEGs的GO功能分析第50-53页
        3.3.5 卵巢发育期间DEGs的KEGG分析第53页
        3.3.6 QRT-PCR 验证和分析性腺发育相关 DEGs第53-56页
        3.3.7 基因SNP和INDEL的鉴定第56页
        3.3.8 基因可变剪接分析第56-57页
    3.4 卵巢分化密切相关的DEGs结构和表达模式分析第57-90页
        3.4.1 foxl2基因第57-68页
        3.4.2 dax1基因第68-76页
        3.4.3 lhx8基因第76-83页
        3.4.4 dnmt1基因第83-90页
    3.5 信号通路对黄河鲤卵巢分化发育的影响第90-107页
        3.5.1 notch信号通路抑制剂DAPT对黄河鲤卵巢分化发育的影响第90-103页
        3.5.2 NF-κB信号通路对黄河鲤卵巢分化的影响第103-107页
    3.6 TPT对黄河鲤卵巢分化发育的影响第107-120页
        3.6.1 TPT对原始性腺分化发育的影响第107页
        3.6.2 TPT对体外短期培养原始性腺基因表达的影响第107-108页
        3.6.3 TPT对体外短期培养幼稚精、卵巢基因表达的影响第108-110页
        3.6.4 TPT处理黄河鲤原始性腺、幼稚精卵巢的转录物组分析第110-120页
4 讨论第120-140页
    4.1 黄河鲤卵巢分化关键时间的确定为研究卵巢发育提供了基础资料第120-121页
    4.2 转录组测序研究卵巢分化发育的分子机制第121-126页
        4.2.1 三个卵巢发育时期的形态学和基因表达特征第122-123页
        4.2.2 与卵巢分化发育相关的信号通路第123-125页
        4.2.3 PGC-OJ的DEGs是重要的候选基因资源第125页
        4.2.4 基因的选择性剪切呈现了丰富的的遗传信息第125-126页
    4.3 卵巢分化发育候选基因结构和表达分析第126-132页
        4.3.1 Foxl2基因第126-128页
        4.3.2 Dax1基因第128-129页
        4.3.3 Lhx8基因第129-130页
        4.3.4 Dnmt1基因第130-132页
    4.4 信号通路对黄河鲤卵巢分化发育的影响第132-136页
        4.4.1 Notch信号通路抑制剂DAPT参与调控黄河鲤卵巢分化第132-134页
        4.4.2 NF-κB信号参与调控黄河鲤精、卵巢分化第134-136页
    4.5 TPT对黄河鲤卵巢分化发育的影响第136-140页
        4.5.1 TPT抑制黄河鲤仔鱼卵巢的分化第136-137页
        4.5.2 TPT调控类固醇合成相关基因的表达抑制卵巢的分化发育。第137页
        4.5.3 转录组测序分析TPT对卵巢分化发育的干扰机制第137-140页
5. 结论第140-142页
    5.1 首次确定黄河鲤性腺初始分化的关键时间在 45-50 dpf第140页
    5.2 分析不同发育时期卵巢转录组信息发现与卵巢分化密切相关的基因和信号通路第140页
    5.3 Foxl2、dax1、lhx8、dnmt1可能分别参与了卵巢的分化发育和功能维持第140页
    5.4 Notch和NF-κB信号通路可能参与调控黄河鲤卵巢发育第140-141页
    5.5 TPT诱导性腺分化的分子机制可能与类固醇激素生物合成有关第141-142页
参考文献第142-158页
附录第158-188页
    附录A 缩略语第158-161页
    附录B 附表第161-165页
    附录C 附图第165-188页
致谢第188-191页

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