| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| 1.1 离子液体概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 离子液体概念及分类 | 第13页 |
| 1.1.2 离子液体的应用 | 第13-14页 |
| 1.2 有关离子液体毒性的研究 | 第14-17页 |
| 1.2.1 离子液体对植物的影响 | 第15页 |
| 1.2.2 离子液体对水生生物的影响 | 第15-16页 |
| 1.2.3 离子液体对微生物的影响 | 第16-17页 |
| 1.2.4 离子液体对土壤动物的影响 | 第17页 |
| 1.3 土壤微生物生态学研究方法 | 第17-22页 |
| 1.3.1 可培养微生物数量 | 第18页 |
| 1.3.2 土壤酶 | 第18-20页 |
| 1.3.2.1 土壤酶分类研究 | 第19页 |
| 1.3.2.2 土壤酶毒理研究 | 第19-20页 |
| 1.3.3 末端限制性片段长度多态性分析技术 (T-RFLP) | 第20-21页 |
| 1.3.4 实时荧光定量PCR技术(RT-PCR) | 第21-22页 |
| 1.4 小结 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-41页 |
| 2.1 药品试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.1 离子液体 | 第23页 |
| 2.1.2 其他药品试剂 | 第23-24页 |
| 2.2 仪器设备 | 第24页 |
| 2.3 供试土壤 | 第24-25页 |
| 2.3.1 土样基本理化性质 | 第24-25页 |
| 2.3.2 土壤染毒 | 第25页 |
| 2.4 微生物菌落计数实验 | 第25-26页 |
| 2.4.1 土壤稀释液的制备 | 第25页 |
| 2.4.2 细菌的计数 | 第25页 |
| 2.4.3 真菌的计数 | 第25-26页 |
| 2.4.4 放线菌的计数 | 第26页 |
| 2.4.5 土壤含菌量的计算 | 第26页 |
| 2.4.6 数据处理 | 第26页 |
| 2.5 土壤酶活性的测定方法 | 第26-32页 |
| 2.5.1 脲酶测定 | 第26-29页 |
| 2.5.1.1 基本原理 | 第26-27页 |
| 2.5.1.2 溶液配制 | 第27页 |
| 2.5.1.3 标准曲线绘制 | 第27-28页 |
| 2.5.1.4 活性测定 | 第28页 |
| 2.5.1.5 结果计算 | 第28-29页 |
| 2.5.2 酸性磷酸酶测定 | 第29-30页 |
| 2.5.2.1 基本原理 | 第29页 |
| 2.5.2.2 试剂配制 | 第29页 |
| 2.5.2.3 标准曲线绘制 | 第29-30页 |
| 2.5.2.4 活性测定 | 第30页 |
| 2.5.2.5 结果计算 | 第30页 |
| 2.5.3 β-葡糖苷酶测定 | 第30-32页 |
| 2.5.3.1 基本原理 | 第31页 |
| 2.5.3.2 试剂配制 | 第31页 |
| 2.5.3.3 标准曲线绘制 | 第31页 |
| 2.5.3.4 活性测定 | 第31-32页 |
| 2.5.3.5 结果计算 | 第32页 |
| 2.5.4 数据处理 | 第32页 |
| 2.6 末端限制性片段长度多样性（T-RFLP）实验 | 第32-34页 |
| 2.6.1 土壤总DNA的提取 | 第32-33页 |
| 2.6.2 细菌16sRNA片段的PCR扩增 | 第33-34页 |
| 2.6.3 16srDNA片段的酶切 | 第34页 |
| 2.6.4 T-RFLP检测及数据分析 | 第34页 |
| 2.7 氨氧化微生物基因表达丰度——RT-PCR实验 | 第34-41页 |
| 2.7.1 土壤基因组DNA的提取 | 第34页 |
| 2.7.2 amoA基因的PCR扩增 | 第34-36页 |
| 2.7.3 连接转化 | 第36页 |
| 2.7.4 质粒的提取 | 第36页 |
| 2.7.5 质粒的鉴定 | 第36-37页 |
| 2.7.6 质粒标准品的制备 | 第37-38页 |
| 2.7.7 标准曲线的制作 | 第38-40页 |
| 2.7.8 样品的实时荧光定量PCR检测 | 第40页 |
| 2.7.9 数据统计与分析 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-63页 |
| 3.1 离子液体对土壤可培养微生物数量的影响 | 第41-46页 |
| 3.1.1 离子液体对细菌数量的影响 | 第41-42页 |
| 3.1.2 离子液体对真菌数量的影响 | 第42-44页 |
| 3.1.3 离子液体对放线菌数量的影响 | 第44-46页 |
| 3.2 离子液体对土壤酶活性影响 | 第46-51页 |
| 3.2.1 离子液体对土壤脲酶活性的影响 | 第46-48页 |
| 3.2.2 离子液体对土壤酸性磷酸酶活性的影响 | 第48-50页 |
| 3.2.3 离子液体对土壤β-葡糖苷酶活性的影响 | 第50-51页 |
| 3.3 离子液体对土壤微生物群落多样性的影响 | 第51-57页 |
| 3.3.1 [C_4mim]Br对土壤中微生物群落结构及多样性的影响 | 第51-53页 |
| 3.3.2 [C_6mim]Br对土壤中微生物群落结构及多样性的影响 | 第53-55页 |
| 3.3.3 [C_(10)mim]Br对土壤中微生物群落结构及多样性的影响 | 第55-56页 |
| 3.3.4 MspⅠ酶切片段菌种分析 | 第56-57页 |
| 3.4 离子液体对土壤氨氧化细菌基因拷贝数的影响 | 第57-59页 |
| 3.4.1 离子液体[C_4mim]Br对AOB基因表达丰度的影响 | 第57页 |
| 3.4.2 离子液体[C_6mim]Br对AOB基因表达丰度的影响 | 第57-58页 |
| 3.4.3 离子液体[C_(10)mim]Br对AOB基因表达丰度的影响 | 第58-59页 |
| 3.5 离子液体对土壤氨氧化古菌基因拷贝数的影响 | 第59-63页 |
| 3.5.1 离子液体[C_4mim]Br对AOA基因表达丰度的影响 | 第59-60页 |
| 3.5.2 离子液体[C_6mim]Br对AOA基因表达丰度的影响 | 第60-61页 |
| 3.5.3 离子液体[C_(10)mim]Br对AOA基因表达丰度的影响 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-67页 |
| 4.1 离子液体对土壤中可培养微生物数量的影响 | 第63-64页 |
| 4.2 离子液体土壤酶活性影响 | 第64页 |
| 4.3 离子液体对土壤微生物群落多样性的影响 | 第64-65页 |
| 4.4 离子液体对土壤氨氧化微生物基因拷贝数的影响 | 第65-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 6 本论文创新之处 | 第68-69页 |
| 7 参考文献 | 第69-76页 |
| 8 致谢 | 第76-77页 |
| 9 攻读学位期间发表论文 | 第77页 |
