| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略语 | 第12-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-31页 |
| 1.1 半夏凝集素的凝集性 | 第17-20页 |
| 1.1.1 半夏简介 | 第17-18页 |
| 1.1.2 凝集素发展史 | 第18-19页 |
| 1.1.3 半夏凝集素发展史 | 第19-20页 |
| 1.2 半夏凝集素的工业应用 | 第20-22页 |
| 1.2.1 半夏凝集素的生物反应表达 | 第20-21页 |
| 1.2.2 半夏凝集素的农业应用 | 第21-22页 |
| 1.3 半夏凝集素的医学研究进展 | 第22-29页 |
| 1.3.1 膜电位影响与膜受体 | 第22-23页 |
| 1.3.2 PTA引起的信号类细胞凋亡 | 第23-24页 |
| 1.3.3 机体的免疫 | 第24-27页 |
| 1.3.4 细胞自噬 | 第27-29页 |
| 1.3.5 医学其他应用 | 第29页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第29-31页 |
| 第二章 半夏的组织培养与热胁迫后恢复 | 第31-44页 |
| 2.1 实验材料和试剂 | 第32-33页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第32页 |
| 2.1.2 试剂和仪器 | 第32-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-37页 |
| 2.2.1 母液配置 | 第33-34页 |
| 2.2.2 材料处理 | 第34-35页 |
| 2.2.3 半夏的组织培养 | 第35页 |
| 2.2.4 半夏组培苗的乙烯利处理 | 第35-36页 |
| 2.2.5 半夏组培苗的高温胁迫处理 | 第36页 |
| 2.2.6 半夏愈伤组织生根培养，苗诱导培养 | 第36-37页 |
| 2.3 结果与分析 | 第37-42页 |
| 2.3.1 3.5 mg/L 6-BA+MS培养基培养半夏无菌苗 | 第37-38页 |
| 2.3.2 不同激素对半夏愈伤组织诱导 | 第38-39页 |
| 2.3.3 乙烯利处理半夏实验结果 | 第39-40页 |
| 2.3.4 乙烯利处理半夏组培苗枯萎状况 | 第40页 |
| 2.3.5 乙烯利处理下半夏块茎生长大小 | 第40-41页 |
| 2.3.6 热胁迫后半夏植株的恢复 | 第41-42页 |
| 2.3.7 半夏愈伤组织生根培养 | 第42页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 PTA结构与分子研究 | 第44-76页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第45-50页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第45-46页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第46页 |
| 3.1.4 实验涉及质粒以及质粒图谱 | 第46-49页 |
| 3.1.5 实验流程图 | 第49-50页 |
| 3.2 实验方法 | 第50-66页 |
| 3.2.1 SDS提取DNA | 第50-51页 |
| 3.2.2Trizol试液提取RNA | 第51页 |
| 3.2.3 PCR引物设计 | 第51-53页 |
| 3.2.4 M-Mu LV法Reverse PCR | 第53-55页 |
| 3.2.5 PCR扩增DNA序列 | 第55-56页 |
| 3.2.6 割胶回收 | 第56页 |
| 3.2.7 E.coli DH5α 感受态细胞制作 | 第56-57页 |
| 3.2.8 TA克隆 | 第57-58页 |
| 3.2.9 质粒提取 | 第58-59页 |
| 3.2.10 双酶切实验 | 第59-60页 |
| 3.2.11 质粒转化 | 第60页 |
| 3.2.12 p Cambia1303质粒构建 | 第60-61页 |
| 3.2.13 LBA4404农杆菌感受态细胞制作 | 第61页 |
| 3.2.14 LBA4404农杆菌载体构建 | 第61-62页 |
| 3.2.15 PTA点突变序列构建 | 第62-63页 |
| 3.2.16 EGFP-N1载体构建 | 第63-64页 |
| 3.2.17 PTA环肽结构基因扩增 | 第64-65页 |
| 3.2.18 PTA的RACE初步探索 | 第65页 |
| 3.2.19 PTA抗性大肠杆菌菌株的紫外诱变 | 第65-66页 |
| 3.3 结果与分析 | 第66-74页 |
| 3.3.1 PTA序列分析 | 第66-67页 |
| 3.3.2 Antheprot Graphic viewer分析PTA信号肽位置 | 第67-68页 |
| 3.3.3 PTA的序列扩增 | 第68页 |
| 3.3.4 PTA测序结果 | 第68-71页 |
| 3.3.5 PTA的点突变序列 | 第71页 |
| 3.3.6 酶切实验结果 | 第71-72页 |
| 3.3.7 菌液PCR | 第72页 |
| 3.3.8 紫外诱变耐PTA筛选 | 第72-73页 |
| 3.3.9 PTA分子的单酶切产物 | 第73-74页 |
| 3.3.10 PTA短肽PCR电泳 | 第74页 |
| 3.3.11 PTA短肽TA克隆菌液PCR | 第74页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第74-76页 |
| 第四章 PTA的浮萍生物表达 | 第76-84页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第77-78页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第77页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第77页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第77-78页 |
| 4.2 实验步骤 | 第78-80页 |
| 4.2.1 浮萍无菌体系 | 第78页 |
| 4.2.2 浮萍祛藻纯化培养 | 第78页 |
| 4.2.3 浮萍的无菌培养 | 第78-79页 |
| 4.2.4 农杆菌转化实验 | 第79页 |
| 4.2.5 浮萍中转基因成分的鉴定 | 第79-80页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第80-83页 |
| 4.3.1 浮萍的去藻化培养 | 第80-81页 |
| 4.3.2 浮萍转化培养 | 第81页 |
| 4.3.3 浮萍最终生长状态 | 第81-82页 |
| 4.3.4 转基因浮萍一次筛选后PCR鉴定 | 第82-83页 |
| 4.3.5 转基因浮萍二次筛选后PCR鉴定 | 第83页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第83-84页 |
| 结论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-95页 |
| 成果 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
