| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 heme简介 | 第10页 |
| 1.2 heme合成以及调控 | 第10-13页 |
| 1.2.1 heme的合成 | 第10-11页 |
| 1.2.2 heme的调控 | 第11-13页 |
| 1.3 heme转运蛋白 | 第13-14页 |
| 1.4 ALA简介 | 第14-17页 |
| 1.4.1 ALA的合成 | 第15-16页 |
| 1.4.2 ALA的C4合成途径 | 第16-17页 |
| 1.4.3 ALA的C5合成途径以及研究进展 | 第17页 |
| 1.5 蛋白降解标签 | 第17-18页 |
| 1.6 本论文的研究内容与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-26页 |
| 2.1.0 实验使用的菌株与质粒 | 第20-21页 |
| 2.1.1 实验使用的引物序列 | 第21-23页 |
| 2.1.2 实验常用的生化试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 实验使用的工具酶 | 第23页 |
| 2.1.4 实验使用的试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.1.5 培养基的配置 | 第24页 |
| 2.1.6 常用溶液及缓冲液的配置 | 第24-25页 |
| 2.1.7 仪器和设备 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.2.1 菌种、质粒、核酸片段的保藏 | 第26页 |
| 2.2.2 PCR扩增 | 第26页 |
| 2.2.3 PCR产物回收 | 第26-27页 |
| 2.2.4 质粒DNA提取 | 第27页 |
| 2.2.5 基因组DNA提取 | 第27页 |
| 2.2.6 谷氨酸棒杆菌电转感受态细胞的制备 | 第27页 |
| 2.2.7 体外组装目的片段和载体 | 第27-28页 |
| 2.2.8 大肠杆菌的常规转化 | 第28页 |
| 2.2.9 谷氨酸棒状杆菌的电转化 | 第28页 |
| 2.2.10 谷氨酸棒杆菌总RNA提取 | 第28-29页 |
| 2.2.11 荧光定量PCR | 第29-30页 |
| 2.3 质粒与菌株构建 | 第30-35页 |
| 2.3.1 无标记基因敲除 | 第30页 |
| 2.3.2 重组子的筛选与鉴定 | 第30页 |
| 2.3.3 质粒pK-JL-△hrtBA、pK-JL-△hmuTUV的构建 | 第30-33页 |
| 2.3.4 菌株WT-H、BASV-H的构建 | 第33页 |
| 2.3.5 菌株WT-HH、BASV-HH的构建 | 第33-34页 |
| 2.3.6 菌株PECX、SEAL、SEAL-H、SEAL-HH、SEALB、SEALB-H、SEALB-HH的构建 | 第34-35页 |
| 2.4 发酵方法 | 第35-39页 |
| 2.4.1 种子培养 | 第35页 |
| 2.4.2 摇瓶发酵 | 第35页 |
| 2.4.3 发酵产物的检测 | 第35-39页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第39-56页 |
| 3.1 血红素转运蛋白缺失对胞内血红素动态平衡的影响 | 第39-45页 |
| 3.1.1 菌体生长状况 | 第39页 |
| 3.1.2 游离血红素的检测 | 第39-40页 |
| 3.1.3 胆色素原的检测 | 第40-41页 |
| 3.1.4 卟啉化合物的检测 | 第41-43页 |
| 3.1.5 血红素转录水平调控 | 第43-45页 |
| 3.2 血红素转运蛋白缺失对ALA合成菌血红素代谢调控的影响 | 第45-56页 |
| 3.2.1 菌株生长及葡萄糖消耗情况 | 第45-46页 |
| 3.2.2 菌液中ALA的积累 | 第46-47页 |
| 3.2.3 副产物乙酸、乳酸的积累 | 第47-48页 |
| 3.2.4 游离血红素的检测 | 第48-50页 |
| 3.2.5 胆色素原的检测 | 第50页 |
| 3.2.6 卟啉化合物的检测 | 第50-52页 |
| 3.2.7 血红素转录水平调控 | 第52-56页 |
| 全文总结 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第66页 |
