| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第10-12页 |
| 一、背景 | 第12-18页 |
| 1. Toll信号途径相关研究进展 | 第12-14页 |
| 2. TRAF6在先天免疫信号途径中的研究进展 | 第14-16页 |
| 3. Ecsit在先天免疫信号途径中的研究进展 | 第16-17页 |
| 4. 对虾白斑综合征的相关研究背景 | 第17页 |
| 5. 本论文所要研究的科学问题 | 第17-18页 |
| 二、实验材料与方法 | 第18-28页 |
| 1. 实验材料 | 第18-19页 |
| 1.1 实验动物 | 第18页 |
| 1.2 病毒的获得与重组蛋白载体构建过程 | 第18页 |
| 1.3 实验试剂 | 第18-19页 |
| 2. 试验方法 | 第19-28页 |
| 2.1 对虾病毒感染 | 第19页 |
| 2.2 RNA的提取与cDNA的合成 | 第19页 |
| 2.3 dsRNA的合成及体内干扰实验 | 第19-21页 |
| 2.4 组织蛋白的提取 | 第21页 |
| 2.5 重组表达载体的构建 | 第21页 |
| 2.6 重组蛋白的表达纯化与抗体制备 | 第21-23页 |
| 2.7 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第23-24页 |
| 2.8 pull-down实验 | 第24页 |
| 2.9 对虾存活率统计 | 第24页 |
| 2.10 核质蛋白分离提取实验 | 第24-25页 |
| 2.11 免疫细胞化学实验(Immunocytochemistry) | 第25页 |
| 2.12 蛋白质免疫印记实验(western blot) | 第25-26页 |
| 2.13 免疫共沉淀实验(Co-IP) | 第26页 |
| 2.14 染色质免疫共沉淀实验(ChIP) | 第26-27页 |
| 2.15 试验中所涉及的引物序列 | 第27-28页 |
| 三、结果 | 第28-52页 |
| 1. 对虾通过MjTLRs-MjDorsal-ie1途径调控体内WSSV复制 | 第28-35页 |
| 1.1 中日本囊对虾中不同TLRs的序列比对与进化分析 | 第28-30页 |
| 1.2 WSSV感染后日本囊对虾三种TLRs的表达模式分析 | 第30-31页 |
| 1.3 三种MjTLRs干扰引物设计与特异性检测 | 第31-32页 |
| 1.4 干扰MjTLR3有利于对虾的存活 | 第32-33页 |
| 1.5 对虾MjTLRs通过调节其MjDorsal入核和MjDorsal与病毒ie1启动子结合调控病毒复制 | 第33-35页 |
| 2. MjEcsit在MjTLRs下游参与MjTLRs-MjEcsit-MjDorsal-ie1信号传递 | 第35-39页 |
| 2.1 WSSV的感染促进对虾中MjEcsit表达上调与核质分布变化 | 第35-37页 |
| 2.2 干扰MjTLRs影响MjEcsit的表达 | 第37-38页 |
| 2.3 MjEcsit影响MjDorsal-ie1信号传递过程 | 第38-39页 |
| 3. 病毒刺激后,对虾MjEcsit表达及泛素化增强并且与MjDorsal相互作用增强,促进MjTLRs-MjEcsit泛素化-MjDorsal-ie1信号传递过程 | 第39-43页 |
| 3.1 WSSV感染增强MjEcsit的泛素化 | 第39-40页 |
| 3.2 干扰MjTLRs影响MjEcsit的核质分布及MjEcsit与MjDorsal的相互作用 | 第40-42页 |
| 3.3 MG132处理增强MjEcsit的泛素化和MjEcsit与MjDorsal的相互作用,促进病毒复制 | 第42-43页 |
| 4. 病毒感染后,MjTRAF6与MjEcsit相互作用并泛素化MjEcsit | 第43-47页 |
| 4.1 MjTRAF6参与WSSV感染 | 第43-44页 |
| 4.2 MjTRAF6通过RING结构域与MATH结构域与MjEcsit相互作用 | 第44-46页 |
| 4.3 MjTRAF6介导MjEcsit的泛素化 | 第46-47页 |
| 5. MjTRAF6参与MjTLRs-MjTRAF6-MjEcsit-MjDorsal-ie1信号传递过程 | 第47-52页 |
| 5.1 MjTRAF6在MjTLRs下游发挥作用 | 第47-48页 |
| 5.2 MjTRAF6促进病毒复制 | 第48-49页 |
| 5.3 MjTRAF6通过影响MjEcsit-MjDorsal的相互作用和核质分布发挥作用 | 第49-52页 |
| 总结 | 第52-54页 |
| 讨论 | 第54-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 已发表或整理的文章 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第69页 |
