摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
英文缩写词(ABBREVIATIONS) | 第10-13页 |
1 文献综述 | 第13-32页 |
引言 | 第13页 |
·卫星细胞与骨骼肌生长和再生 | 第13-24页 |
·肌肉发生与卫星细胞的形成、起源 | 第13-15页 |
·卫星细胞与出生后骨骼肌生长和再生 | 第15-16页 |
·卫星细胞增殖分化调控 | 第16-23页 |
·蛋鸡、肉鸡卫星细胞体外培养差异特性的研究 | 第23-24页 |
·HSPG与骨骼肌发育、损伤修复 | 第24-32页 |
·Syndecan家族在骨骼肌发育再生中的研究进展 | 第24-31页 |
·HS6ST2与卫星细胞增殖分化调控 | 第31-32页 |
·本研究的目的意义 | 第32页 |
2 材料与方法 | 第32-47页 |
·试验动物来源 | 第32-33页 |
·试验试剂与耗材 | 第33-36页 |
·shRNA干扰载体 | 第33页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第33-34页 |
·常用试剂的配制 | 第34-35页 |
·主要仪器设备 | 第35页 |
·主要应用的生物学软件 | 第35-36页 |
·试验方法 | 第36-47页 |
·cDNA模板的制备 | 第36-38页 |
·HS6ST2基因CDS区的克隆与真核表达载体构建 | 第38-43页 |
·细胞试验 | 第43-45页 |
·鸡胚提取物的制备 | 第43页 |
·蛋鸡、肉鸡卫星细胞的分离培养 | 第43-44页 |
·鸡原代骨骼肌卫星细胞的免疫荧光鉴定 | 第44-45页 |
·转染 | 第45页 |
·胆囊收缩素8(CCK8)细胞增殖检测 | 第45页 |
·荧光定量PCR | 第45-47页 |
·数据统计分析 | 第47页 |
3 结果与分析 | 第47-77页 |
·分离的鸡原代SMSCS的鉴定与形态学观察 | 第47-52页 |
·鸡原代SMSCs鉴定 | 第47-48页 |
·体外培养蛋鸡和肉鸡原代SMSCs形态学观察 | 第48-52页 |
·RNA提取效果的检测 | 第52页 |
·REAL-TIME PCR引物的标准曲线和熔解曲线 | 第52-57页 |
·生长期蛋鸡、肉鸡SMSCs体外培养过程中HS6ST2基因的差异表达 | 第57-59页 |
·鸡HS6ST2基因真核表达载体构建 | 第59-61页 |
·鸡HS6ST2基因的克隆 | 第59-60页 |
·HS6ST2真核表达载体的双酶切鉴定 | 第60-61页 |
·HS6ST2基因真核表达载体的扩增效率以及干扰载体的筛选 | 第61-63页 |
·过表达或干扰HS6ST2基因对鸡SMSCs增殖分化的影响 | 第63-69页 |
·过表达或干扰HS6ST2基因后鸡SMSCs细胞形态变化 | 第63-65页 |
·过表达或干扰HS6ST2基因对鸡SMSCs增殖曲线的影响 | 第65-66页 |
·过表达或干扰HS6ST2基因对鸡SMSCs增殖分化关键基因表达的影响 | 第66-69页 |
·过表达或干扰HS6ST2基因对调控鸡SMSCs增殖分化关键信号通路的影响 | 第69-77页 |
·过表达或干扰HS6ST2基因对鸡SMSCs Wnt/β-catenin信号通路的影响 | 第69-72页 |
·过表达或干扰HS6ST2基因对鸡SMSCs TGFβ信号通路的影响 | 第72-74页 |
·过表达或干扰HS6ST2基因对鸡SMSCs Notch信号通路的影响 | 第74-77页 |
4 讨论 | 第77-80页 |
·HS6ST2基因在蛋鸡、肉鸡骨骼肌卫星细胞中的差异表达 | 第77-78页 |
·HS6ST2基因对鸡卫星细胞增殖分化的影响 | 第78-79页 |
·HS6ST2基因对卫星细胞中WNT/B-CATENIN、TGFB/MSTN、NOTCH信号通路的调控 | 第79-80页 |
5 结论 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
攻读硕士研究生期间发表的论文和专利 | 第88页 |