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HS6ST2基因在鸡骨骼肌卫星细胞中功能的初步探讨

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
英文缩写词(ABBREVIATIONS)第10-13页
1 文献综述第13-32页
 引言第13页
   ·卫星细胞与骨骼肌生长和再生第13-24页
     ·肌肉发生与卫星细胞的形成、起源第13-15页
     ·卫星细胞与出生后骨骼肌生长和再生第15-16页
     ·卫星细胞增殖分化调控第16-23页
     ·蛋鸡、肉鸡卫星细胞体外培养差异特性的研究第23-24页
   ·HSPG与骨骼肌发育、损伤修复第24-32页
     ·Syndecan家族在骨骼肌发育再生中的研究进展第24-31页
     ·HS6ST2与卫星细胞增殖分化调控第31-32页
   ·本研究的目的意义第32页
2 材料与方法第32-47页
   ·试验动物来源第32-33页
   ·试验试剂与耗材第33-36页
     ·shRNA干扰载体第33页
     ·主要试剂及试剂盒第33-34页
     ·常用试剂的配制第34-35页
     ·主要仪器设备第35页
     ·主要应用的生物学软件第35-36页
   ·试验方法第36-47页
     ·cDNA模板的制备第36-38页
     ·HS6ST2基因CDS区的克隆与真核表达载体构建第38-43页
     ·细胞试验第43-45页
       ·鸡胚提取物的制备第43页
       ·蛋鸡、肉鸡卫星细胞的分离培养第43-44页
       ·鸡原代骨骼肌卫星细胞的免疫荧光鉴定第44-45页
       ·转染第45页
       ·胆囊收缩素8(CCK8)细胞增殖检测第45页
     ·荧光定量PCR第45-47页
     ·数据统计分析第47页
3 结果与分析第47-77页
   ·分离的鸡原代SMSCS的鉴定与形态学观察第47-52页
     ·鸡原代SMSCs鉴定第47-48页
     ·体外培养蛋鸡和肉鸡原代SMSCs形态学观察第48-52页
   ·RNA提取效果的检测第52页
   ·REAL-TIME PCR引物的标准曲线和熔解曲线第52-57页
   ·生长期蛋鸡、肉鸡SMSCs体外培养过程中HS6ST2基因的差异表达第57-59页
   ·鸡HS6ST2基因真核表达载体构建第59-61页
     ·鸡HS6ST2基因的克隆第59-60页
     ·HS6ST2真核表达载体的双酶切鉴定第60-61页
   ·HS6ST2基因真核表达载体的扩增效率以及干扰载体的筛选第61-63页
   ·过表达或干扰HS6ST2基因对鸡SMSCs增殖分化的影响第63-69页
     ·过表达或干扰HS6ST2基因后鸡SMSCs细胞形态变化第63-65页
     ·过表达或干扰HS6ST2基因对鸡SMSCs增殖曲线的影响第65-66页
     ·过表达或干扰HS6ST2基因对鸡SMSCs增殖分化关键基因表达的影响第66-69页
   ·过表达或干扰HS6ST2基因对调控鸡SMSCs增殖分化关键信号通路的影响第69-77页
     ·过表达或干扰HS6ST2基因对鸡SMSCs Wnt/β-catenin信号通路的影响第69-72页
     ·过表达或干扰HS6ST2基因对鸡SMSCs TGFβ信号通路的影响第72-74页
     ·过表达或干扰HS6ST2基因对鸡SMSCs Notch信号通路的影响第74-77页
4 讨论第77-80页
   ·HS6ST2基因在蛋鸡、肉鸡骨骼肌卫星细胞中的差异表达第77-78页
   ·HS6ST2基因对鸡卫星细胞增殖分化的影响第78-79页
   ·HS6ST2基因对卫星细胞中WNT/B-CATENIN、TGFB/MSTN、NOTCH信号通路的调控第79-80页
5 结论第80-81页
参考文献第81-87页
致谢第87-88页
攻读硕士研究生期间发表的论文和专利第88页

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