| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 英文缩写中文对照 | 第8-9页 |
| 插图一 pUCm-T vector | 第9-10页 |
| 插图二 pHT43 vector | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-22页 |
| 一、木聚糖的结构与来源 | 第11-12页 |
| 二、木聚糖酶 | 第12-14页 |
| 1 木聚糖酶的种类 | 第12页 |
| 2 木聚糖酶的结构 | 第12-13页 |
| 3 木聚糖酶的催化机制 | 第13-14页 |
| 4 木聚糖酶的活性测定 | 第14页 |
| 三、木聚糖酶的应用 | 第14-17页 |
| 1 木聚糖酶在畜牧行业中的应用 | 第14-17页 |
| 2 木聚糖酶在食品行业中的应用 | 第17页 |
| 四、枯草芽孢杆菌表达系统概述 | 第17-22页 |
| 1 枯草芽孢杆菌表达系统 | 第17-20页 |
| 2 枯草芽孢杆菌的表达载体 | 第20-22页 |
| 引言 | 第22-23页 |
| 1 材料与方法 | 第23-49页 |
| 试验一 多拷贝木聚糖酶基因扩增整合型载体的构建 | 第23-36页 |
| ·试验一材料 | 第23-24页 |
| ·试验一试剂 | 第23-24页 |
| ·试验一仪器 | 第24页 |
| ·试验一方法 | 第24-36页 |
| ·pHT43整合型载体构建 | 第24-28页 |
| ·木聚糖酶基因xynT_CBD单拷贝原核扩增载体的构建 | 第28-31页 |
| ·双拷贝载体pHT43(+)/2(xynT_CBD)的构建 | 第31-34页 |
| ·三拷贝载体pHT43(+)/3(xynT_CBD)的构建 | 第34-36页 |
| 试验二 枯草芽孢杆菌多拷贝木聚糖酶基因xynT整合型载体pHT43(+)/3(xynT_CBD)的转化及表达 | 第36-46页 |
| ·试验二材料 | 第36-39页 |
| ·试验二试剂 | 第36-38页 |
| ·试验二仪器 | 第38-39页 |
| ·试验二方法 | 第39-46页 |
| ·pHT43(+)/3(xynT_CBD)质粒的制备 | 第39页 |
| ·制备枯草表达宿主Bacillus subtilis WB800N感受态 | 第39页 |
| ·转化枯草表达宿主Bacillus subtilis WB800N感受态 | 第39页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达宿主Bacillus subtilis WB800N阳性转化子的删选与鉴定 | 第39-41页 |
| ·Bacillus subtilis WB800N阳性转化子的拷贝数鉴定 | 第41页 |
| ·Bacillus subtilis WB800N阳性转化子的IPTG诱导表达 | 第41-42页 |
| ·Ni-NTA树脂亲和层析纯化蛋白 | 第42页 |
| ·TCA蛋白的沉淀富集 | 第42-43页 |
| ·SDS-PAGE聚丙烯酰胺分析 | 第43-44页 |
| ·Western-Blotting蛋白印迹 | 第44-46页 |
| 试验三 枯草芽孢杆菌表达木聚糖酶的活力与酶学特性 | 第46-49页 |
| ·试验三材料 | 第46页 |
| ·试验三试剂 | 第46页 |
| ·试验三仪器 | 第46页 |
| ·试验三方法 | 第46-49页 |
| ·木聚糖酶酶活性分析 | 第46-47页 |
| ·木聚糖酶酶学特性分析 | 第47-49页 |
| 2 试验结果 | 第49-55页 |
| ·枯草芽孢杆菌Spo0A基因的扩增 | 第49页 |
| ·整合性重组质粒的鉴定 | 第49-50页 |
| ·木聚糖酶基因xynT_CBD的扩增 | 第50页 |
| ·多拷贝木聚糖酶基因xynT扩增整合型载体的的鉴定 | 第50-51页 |
| ·枯草芽孢杆菌阳性转化子木聚糖酶基因xynT_CBD的扩增 | 第51-52页 |
| ·枯草芽孢杆菌阳性转化子G6PD的扩增 | 第52页 |
| ·qPCR | 第52-53页 |
| ·SDS-PAGE图 | 第53-54页 |
| ·Western-Blotting蛋白图 | 第54页 |
| ·粗酶液酶活的测定结果 | 第54页 |
| ·pH对木聚糖酶酶活的影响 | 第54页 |
| ·温度对木聚糖酶酶活的影响 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| ·枯草芽孢杆菌整合性表达载体的构建 | 第55页 |
| ·多拷贝木聚糖酶基因xynT载体的构建 | 第55-56页 |
| ·多拷贝整合载体的枯草转化及其验证 | 第56页 |
| ·木聚糖酶的酶学特性 | 第56-57页 |
| 4 结论 | 第57-59页 |
| ·小结 | 第57页 |
| ·创新点 | 第57-58页 |
| ·后续展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介及主要发表论文 | 第66页 |
