| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 灰飞虱生物学特性 | 第10-11页 |
| 2 灰飞虱的发生规律和防治方法 | 第11-14页 |
| ·发生世代和历期 | 第11-12页 |
| ·田间发生规律 | 第12页 |
| ·危害特点 | 第12页 |
| ·灰飞虱大发生的原因 | 第12-13页 |
| ·化学防治在灰飞虱防控中的作用 | 第13-14页 |
| 3 细胞色素P450酶系 | 第14-15页 |
| ·细胞色素P450 | 第14页 |
| ·NADPH-细胞色素P450还原酶(CPR) | 第14-15页 |
| ·CPR的功能 | 第14-15页 |
| ·CPR的物种间同源性分析 | 第15页 |
| ·细胞色素P450介导的昆虫抗性研究 | 第15页 |
| 4 RNA干扰技术 | 第15-19页 |
| ·RNA干扰的定义 | 第15-16页 |
| ·RNA干扰的分子机理 | 第16-17页 |
| ·RNA干扰的应用现状 | 第17页 |
| ·RNAi在生命科学研究中的作用 | 第17-18页 |
| ·RNAi技术方法探讨 | 第18-19页 |
| ·昆虫摄入dsRNA的方式 | 第18-19页 |
| 5 本文研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第2章 灰飞虱NADPH-细胞色素P450还原酶全长克隆及序列分析 | 第20-32页 |
| 摘要 | 第20页 |
| 前言 | 第20-21页 |
| 1 试验材料 | 第21-22页 |
| ·供试昆虫及饲养 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| 2 试验方法 | 第22-28页 |
| ·灰飞虱总RNA提取 | 第22-23页 |
| ·RNA质量的检测 | 第23-25页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| ·cDNA第一链的合成及基因克隆 | 第23-24页 |
| ·PCR扩增灰飞虱体内LSCPR片段 | 第24-25页 |
| ·PCR产物纯化回收 | 第25页 |
| ·连接反应 | 第25-26页 |
| ·转化反应 | 第26页 |
| ·LSCPR的cDNA全长的获得 | 第26-27页 |
| ·5’和3'RACE cDNA模板的合成 | 第26-27页 |
| ·NADPH-细胞色素P450还原酶RACE引物 | 第27页 |
| ·RACE-PCR反应体系及条件 | 第27页 |
| ·目标序列的测定 | 第27-28页 |
| 3 结果分析 | 第28-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 第3章 灰飞虱NADPH-细胞色素P450还原酶RNAI功能分析 | 第32-42页 |
| 摘要 | 第32-33页 |
| 1 材料与方法 | 第33-38页 |
| ·供试昆虫 | 第33页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第33页 |
| ·试验方法 | 第33-38页 |
| ·RNA提取 | 第33页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第33页 |
| ·dsRNA合成引物 | 第33-34页 |
| ·PCR扩增 | 第34页 |
| ·回收纯化 | 第34-35页 |
| ·dsRNA合成 | 第35页 |
| ·dsRNA喂食实验 | 第35页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第35-38页 |
| 2 结果 | 第38-40页 |
| ·dsRNA双链的合成 | 第38-39页 |
| ·灰飞虱NADPH-细胞色素P450还原酶RNAi、定量检测和表型分析 | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 全文结论及创新点 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
