| ABSTRACT | 第1-10页 |
| 缩略词中英文对照(Abbreviation) | 第10-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-25页 |
| 1 家禽卵巢及卵泡发育概述 | 第11-14页 |
| ·家禽的卵巢及卵泡发育 | 第11-13页 |
| ·家禽卵泡颗粒细胞 | 第13页 |
| ·家禽卵泡颗粒细胞与卵泡闭锁的关系 | 第13-14页 |
| 2 卵泡刺激素(FSH)概述 | 第14-16页 |
| ·卵泡刺激素 | 第14页 |
| ·卵泡刺激素的作用机制 | 第14-15页 |
| ·卵泡刺激素与卵泡颗粒细胞的关系 | 第15-16页 |
| 3 miRNA概述 | 第16-18页 |
| ·miRNA及其特征 | 第16-17页 |
| ·miRNA在动物生殖中的研究进展 | 第17-18页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 参考文献 | 第19-25页 |
| 第二篇 试验部分 | 第25-59页 |
| 第一章 FSH对鸡小黄卵泡颗粒细胞凋亡的调控作用 | 第25-39页 |
| 1 实验材料 | 第25-27页 |
| ·实验动物及样品采集 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·主要溶液及其配置 | 第26-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-30页 |
| ·鸡小黄卵泡颗粒细胞的分离培养 | 第27页 |
| ·放射免疫法测定颗粒细胞上清液中孕酮含量 | 第27-28页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡情况 | 第28页 |
| ·颗粒细胞总RNA的提取及其浓度和纯度检测 | 第28-29页 |
| ·RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·RNA浓度和纯度检测 | 第29页 |
| ·反转录cDNA的合成 | 第29-30页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第30页 |
| ·数据分析 | 第30页 |
| 3 实验结果 | 第30-35页 |
| ·鸡小黄卵泡颗粒细胞形态观察 | 第31-32页 |
| ·放射免疫法测定颗粒细胞上清液中孕酮含量 | 第32-33页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡情况 | 第33-34页 |
| ·总RNA质量检测 | 第34-35页 |
| ·Caspase-3基因mRNA的表达情况 | 第35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| ·关于鸡卵泡颗粒细胞的分离培养 | 第35-36页 |
| ·关于FSH与鸡卵泡颗粒细胞的关系 | 第36页 |
| 5 小结 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 第二章 应用高通量测序技术筛选FSH处理鸡卵泡颗粒细胞后差异表达的miRNAs | 第39-59页 |
| 1 实验材料 | 第39-40页 |
| ·鸡卵泡颗粒细胞 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| ·主要溶液及其配置 | 第40页 |
| ·miRNA表达谱测序 | 第40页 |
| ·生物学工具:主要数据库及软件 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-43页 |
| ·鸡卵泡颗粒细胞样品RNA的提取及浓度、纯度检测 | 第40-41页 |
| ·高通量测序筛选FSH处理鸡卵泡颗粒细胞后差异表达的miRNAs | 第41-42页 |
| ·差异表达显著的四个miRNAs的qRT-PCR验证 | 第42-43页 |
| 3 实验结果 | 第43-53页 |
| ·鸡卵泡颗粒细胞总RNA的提取 | 第43页 |
| ·高通量测序筛选FSH处理鸡卵泡颗粒细胞后差异表达的miRNAs | 第43-49页 |
| ·FSH实验组与ITS对照组的小RNA文库的构建 | 第44-45页 |
| ·筛选FSH处理鸡卵泡颗粒细胞后差异表达的miRNAs | 第45-49页 |
| ·对差异表达显著的四个miRNAs进行qRT-PCR验证 | 第49-50页 |
| ·差异表达的miRNAs靶基因的预测及其生物信息学分析 | 第50-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 5 小结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 全文结论 | 第59-61页 |
| 全文创新点 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 附录 | 第65-67页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第67页 |