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柑橘黄龙病病原代谢中ClACP蛋白与ClBirA蛋白表达纯化研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
缩略语表第9-10页
1 前言第10-19页
   ·柑橘黄龙病研究进展及其危害与防治第10-13页
     ·柑橘黄龙病的流行与发展第10页
     ·柑橘黄龙病病原研究与分类第10-11页
     ·柑橘黄龙病田间症状及传播第11-12页
     ·柑橘黄龙病防治方法及探讨第12-13页
       ·传统的防治方法第12页
       ·新型抗菌药物的研究意义第12-13页
   ·脂肪酸代谢第13-15页
     ·细菌脂肪酸代谢途径介绍第13页
     ·酰基载体蛋白的功能与作用第13-14页
     ·柑橘黄龙病病原菌中β-羟脂酰-ACP脱水酶与酰基载体蛋白作用关系第14-15页
   ·生物素合成途径中BirA蛋白结构与功能研究第15-16页
   ·蛋白质晶体学第16-18页
     ·蛋白质晶体学的发展与研究基础第16-17页
     ·蛋白质晶体学的研究方法第17页
     ·蛋白质晶体的生长与筛选第17-18页
     ·蛋白质晶体学与药物设计第18页
   ·研究目的与意义第18-19页
2 材料与方法第19-29页
   ·实验材料第19-23页
     ·模板DNA、菌株与质粒第19页
     ·主要试剂与耗材第19-20页
     ·主要仪器设备第20-21页
     ·主要溶液的配置第21-23页
   ·实验方法第23-29页
     ·基因克隆第23-25页
       ·目的片段的扩增第23页
       ·目的片段的检测与回收第23页
       ·目的片段与载体双酶切第23-24页
       ·目的基因与载体的连接第24页
       ·连接产物转化感受态细胞第24页
       ·检测连接产物第24-25页
     ·蛋白小量表达第25页
     ·蛋白大量表达第25-27页
     ·蛋白浓度的测定第27-28页
     ·蛋白结晶条件的筛选第28页
     ·蛋白晶体的优化第28页
     ·蛋白晶体数据收集第28-29页
3 结果与分析第29-41页
   ·ClAcp基因克隆结果第29页
   ·ClACP蛋白表达结果第29-33页
     ·ClACP蛋白小量表达第29-30页
     ·ClACP蛋白大量表达纯化结果第30-33页
   ·ClFabZ-ClACP蛋白互作的验证第33-36页
   ·ClBirA基因克隆结果第36页
   ·ClBirA蛋白表达纯化第36-41页
     ·pET28a-sumo-ClBirA蛋白小量表达第37页
     ·ClBirA蛋白纯化缓冲液pH的筛选第37-39页
     ·ClBirA蛋白大量表达纯化第39-41页
4 讨论第41-45页
   ·ClACP蛋白存在状态的多样性第42页
   ·自然状态下ClFabZ-ClACP复合物蛋白的获得及结晶条件的筛选第42-44页
   ·ClBirA蛋白的纯化第44-45页
参考文献第45-50页
附图 ClFabZ蛋白晶体的筛选及优化第50-51页
附录 超级感受态细胞的制备第51-52页
致谢第52-53页

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