| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-20页 |
| 第一章 文献综述 | 第20-48页 |
| ·概述 | 第20-21页 |
| ·基因工程研究中的转基因表达差异现象 | 第21-25页 |
| ·转基因表达差异现象及原因 | 第21-23页 |
| ·位置效应引起的外源基因表达差异 | 第23-25页 |
| ·转座子介导的整合位置效应及其影响 | 第25-30页 |
| ·piggyBac转座子概述 | 第26-28页 |
| ·piggyBac转座子介导的转基因整合位置效应 | 第28-30页 |
| ·基于转座子建立的转基因生物的安全问题 | 第30-31页 |
| ·克服转座子介导的转基因整合位置效应和安全隐患的方法 | 第31-35页 |
| ·克服位置效应的策略 | 第31-34页 |
| ·消除转基因潜在安全隐患的策略 | 第34-35页 |
| ·利用位点特异性重组技术和改进的piggyBac转座系统克服转基因位置效应及消除转基因安全隐患的研究进展 | 第35-46页 |
| ·位点特异性重组技术概述 | 第36页 |
| ·利用位点特异性重组系统实现筛选标记删除及消除整合位置效应影响 | 第36-41页 |
| ·利用改进的piggyBac转座系统实现转基因稳定整合及筛选标记删除 | 第41-43页 |
| ·位点特异性重组系统和改进的piggyBac转座系统的联合应用 | 第43-46页 |
| ·不同基因组操作技术联合使用的应用前景 | 第46-48页 |
| 第二章 引言 | 第48-54页 |
| ·研究背景 | 第48-50页 |
| ·研究目的和意义 | 第50-51页 |
| ·研究内容 | 第51-52页 |
| ·研究路线 | 第52-54页 |
| 第三章 基于FLP/FRT系统实现的家蚕个体水平转基因高效、可诱导的定点删除研究 | 第54-90页 |
| ·材料与方法 | 第54-71页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第55-57页 |
| ·实验方法 | 第57-71页 |
| ·结果与分析 | 第71-87页 |
| ·重组载体的获得 | 第71页 |
| ·FLP/FRT系统转基因靶品系和FLP重组酶表达辅助品系的建立 | 第71-75页 |
| ·显微注射FLP重组酶mRNA或表达载体产生阳性转基因重组家蚕 | 第75-78页 |
| ·FLP基因在H-A-1和H-H-1家蚕体内的表达检测 | 第78页 |
| ·靶基因在TTS&H-A-1转基因后代的高效删除 | 第78-81页 |
| ·热激诱导实现靶基因在TTS&H-H-1转基因后代的删除 | 第81-85页 |
| ·位点特异性重组事件的分子鉴定 | 第85-87页 |
| ·小结与讨论 | 第87-90页 |
| 第四章 基于phiC31-RMCE系统实现的家蚕个体水平转基因定点整合研究 | 第90-116页 |
| ·材料与方法 | 第90-94页 |
| ·实验材料 | 第90页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第90页 |
| ·实验方法 | 第90-94页 |
| ·实验结果 | 第94-113页 |
| ·重组载体的获得 | 第94-95页 |
| ·phiC31/att系统转基因靶品系的建立 | 第95-99页 |
| ·利用瞬时表达载体作为phiC31整合酶来源产生阳性位点特异性整合家蚕 | 第99-108页 |
| ·发生于TTS家蚕基因组染色体attB/attB靶位点的位点特异性整合事件 | 第108-111页 |
| ·利用体外合成mRNA作为phiC31整合酶来源产生阳性位点特异性整合家蚕 | 第111页 |
| ·检测转基因整合在SSIS家蚕后代基因组中的遗传稳定性 | 第111-113页 |
| ·小结与讨论 | 第113-116页 |
| 第五章 一种稳定、可置换的安全高效家蚕转基因操作技术的建立 | 第116-150页 |
| ·材料和方法 | 第116-122页 |
| ·实验材料 | 第116页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第116-118页 |
| ·实验方法 | 第118-122页 |
| ·实验结果 | 第122-145页 |
| ·重组载体获得及实验方案设计 | 第122-124页 |
| ·筛选转基因高效表达的TS1-RgG家蚕 | 第124-130页 |
| ·创制不含有转座元件及筛选标记基因的转基因家蚕 | 第130-138页 |
| ·鉴定创制不含有转座元件的转基因家蚕的最优热激处理条件 | 第138-141页 |
| ·检测FibH-EGFP表达框在TS3家蚕后代基因组中的遗传稳定性 | 第141-145页 |
| ·小结与讨论 | 第145-150页 |
| 第六章 综合与结论 | 第150-154页 |
| 论文创新点 | 第154-156页 |
| 下一步研究计划 | 第156-158页 |
| 参考文献 | 第158-170页 |
| 在读期间发表文章、申请专利、参加会议及参研课题 | 第170-172页 |
| 致谢 | 第172-174页 |
