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高产油脂和类胡萝卜素红酵母的选育

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-14页
第一章 文献综述第14-32页
   ·微生物油脂概述第14-15页
     ·微生物油脂的定义第14页
     ·微生物油脂形成机理第14页
     ·微生物油脂的组成第14-15页
   ·产油微生物的种类第15-16页
     ·细菌第15页
     ·酵母第15页
     ·霉菌第15-16页
     ·藻类第16页
   ·微生物油脂的用途第16-17页
     ·奶与奶制品第16页
     ·糕点第16页
     ·乳化饮料第16-17页
     ·饲料工业第17页
     ·医疗行业第17页
   ·类胡萝卜素概述第17-18页
     ·类胡萝卜素定义第17页
     ·类胡萝卜素的存在状态第17页
     ·类胡萝卜素结构与分类第17-18页
     ·类胡萝卜素的功能第18页
   ·类胡萝卜素的分布第18-19页
     ·分布于高等植物第18-19页
     ·分布于动物中第19页
     ·分布于微生物和藻类中第19页
   ·类胡萝卜素的用途第19-21页
     ·作为功能性色素第19-20页
     ·作为化妆品添加剂第20页
     ·作为饲料添加剂第20页
     ·作为医药和保健品第20-21页
   ·类胡萝卜素的提取方法第21页
     ·有机溶剂法第21页
     ·超声波辅助提取法第21页
     ·超临界流体提取法第21页
   ·类胡萝卜素的生产途径第21-22页
     ·化学合成法第21-22页
     ·从植物中提取第22页
     ·微生物发酵法第22页
   ·类胡萝卜素与红酵母第22-25页
     ·红酵母的分类第22-23页
     ·红酵母类胡萝卜素的代谢途径第23-24页
     ·红酵母发酵生产类胡萝卜素第24页
     ·产类胡萝卜素红酵母的诱变育种第24-25页
   ·产类胡萝卜素微生物的基因工程第25-27页
     ·基因工程酵母菌与类胡萝卜素的合成第26-27页
     ·基因工程大肠杆菌与类胡萝卜素合成第27页
   ·酮康唑对红酵母合成类胡萝卜素的影响第27-28页
     ·酮康唑的理化性质与结构第27-28页
     ·酮康唑的作用机理及应用第28页
   ·论文研究背景及研究内容第28-32页
     ·论文研究背景及意义第28-30页
     ·主要研究内容第30-32页
第二章 ARTP诱变选育高产油脂酵母及其培养条件的优化第32-44页
   ·前言第32页
   ·实验材料第32-33页
     ·菌株与培养基第32-33页
     ·主要仪器第33页
   ·实验方法第33-35页
     ·出发菌株的筛选第33-34页
     ·生物量的测定第34页
     ·油脂的提取和产量测定第34页
     ·酵母菌生长曲线的测定第34页
     ·诱变处理及正向突变菌株的筛选第34-35页
     ·遗传稳定性实验第35页
     ·培养条件的优化第35页
     ·油脂成分的分析第35页
   ·结果及分析第35-43页
     ·产油脂酵母菌菌株的筛选及鉴定第35-36页
     ·菌株生长曲线的测定第36-37页
     ·ARTP诱变致死率曲线的测定第37页
     ·高产油脂酵母菌株的筛选第37-38页
     ·菌株Y3遗传稳定性实验第38-39页
     ·菌株Y3发酵条件的优化第39-42页
     ·油脂的组分分析第42-43页
   ·本章小结第43-44页
第三章 高产类胡萝卜素红酵母菌的诱变选育第44-54页
   ·前言第44页
   ·实验材料第44-45页
     ·菌株与培养基第44-45页
     ·主要仪器第45页
   ·实验方法第45-48页
     ·出发菌株的筛选第45-46页
     ·生物量的测定第46页
     ·类胡萝卜素的提取和产量测定第46页
     ·酵母菌生长曲线的测定第46页
     ·诱变处理及正向突变菌株的筛选第46-47页
     ·遗传稳定性实验第47页
     ·类胡萝卜素成分分析第47-48页
   ·结果与讨论第48-52页
     ·出发菌株的筛选第48页
     ·菌株生长曲线的测定第48页
     ·诱变剂量的选择第48-49页
     ·高产类胡萝卜素菌株的筛选第49-51页
     ·遗传稳定性研究第51页
     ·类胡萝卜素成分分析第51-52页
   ·本章小结第52-54页
第四章 高产类胡萝卜素基因工程菌的构建第54-82页
   ·前言第54-55页
   ·实验材料第55-57页
     ·菌株及质粒来源第55-56页
     ·培养基第56-57页
     ·主要试剂和酶第57页
   ·实验方法第57-70页
     ·酵母基因组DNA的提取第57-58页
     ·胶红酵母 5.8S rDNA基因的克隆第58-60页
     ·克隆载体pMD18-rDNA的构建与鉴定第60-63页
     ·HMG CoA基因片段的克隆第63-64页
     ·HMG CoA基因片段与强启动子GPD以及终止子CYC的连接第64-66页
     ·重组载体pPIC-2rDNA的构建第66-67页
     ·重组质粒pPIC-2rDNA-G-H-C的构建第67-69页
     ·胶红酵母的电转化第69-70页
     ·胶红酵母转化株类胡萝卜素产量的测定第70页
   ·结果与讨论第70-80页
     ·酵母基因组DNA的提取第70-71页
     ·胶红酵母 5.8S rDNA基因的克隆第71页
     ·克隆载体pMD18-rDNA的构建及PCR鉴定第71-72页
     ·HMG CoA基因片段的克隆第72-73页
     ·克隆载体PMD18-HMG的构建及PCR鉴定第73页
     ·重组载体pPIC-r DNA1的构建及鉴定第73-74页
     ·重组载体pPIC-2r DNA的构建及鉴定第74-75页
     ·克隆载体pMD18-G-H-C的构建及PCR鉴定第75-76页
     ·重组载体pPIC-2r DNA-G-H-C的构建及鉴定第76-77页
     ·胶红酵母的转化第77-78页
     ·胶红酵母转化株的鉴定第78-79页
     ·重组酵母的类胡萝卜素产量的测定第79-80页
   ·本章小结第80-82页
第五章 酮康唑对胶红酵母类胡萝卜素产量的影响第82-88页
   ·前言第82页
   ·实验材料第82-83页
     ·菌株与培养基第82-83页
   ·实验方法第83-84页
     ·菌种活化及发酵培养第83页
     ·生物量的测定第83页
     ·类胡萝卜素的提取和产量测定第83-84页
   ·结果与讨论第84-86页
     ·不同浓度的酮康唑对胶红酵母类胡萝卜素产量的影响第84-85页
     ·酮康唑的不同添加时间对胶红酵母的色素产量的影响第85-86页
   ·本章小结第86-88页
第六章 结论与展望第88-90页
   ·结论第88-89页
   ·展望第89-90页
参考文献第90-98页
致谢第98-100页
攻读学位期间发表的学术论文目录第100-101页

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