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双酚A引起父源性生殖缺陷的小鼠模型建立与机制研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-13页
注释表第13-15页
第一章 引言第15-33页
   ·文献综述第15-30页
     ·环境内分泌干扰物简介第15页
     ·双酚 A 简介第15-16页
     ·双酚 A 对雄性生殖功能的影响第16-20页
     ·双酚 A 的作用机制第20-22页
     ·精子发生和胚胎发育过程中的表观遗传修饰第22-27页
     ·内分泌干扰物的传代效应(Transgenerational Effects)及机制第27-30页
     ·研究目标第30-31页
     ·课题设计思路第31-33页
第二章 材料与方法第33-53页
   ·材料与仪器设备第33-36页
     ·主要仪器设备第33-34页
     ·实验材料第34-36页
     ·实验动物第36页
   ·实验方法第36-53页
     ·高剂量双酚 A 暴露小鼠动物模型的建立和繁殖传代第36页
     ·低剂量双酚 A 暴露小鼠动物模型的建立和繁殖传代第36-37页
     ·样本的收集和观测指标第37页
     ·F0、F1、F2 代小鼠精子参数检测第37-38页
     ·F1 代小鼠精原细胞的分离和鉴定第38-39页
     ·F1 代小鼠精原细胞 mRNA 表达芯片的检测及生物信息学分析第39-40页
     ·F0 代小鼠精子 DNA 甲基化高通量测序及生物信息学分析第40-43页
     ·精子 DNA 甲基化谱与精原细胞表达谱负相关分析第43页
     ·亚硫酸氢盐测序 PCR第43-45页
     ·石蜡包埋及切片第45页
     ·苏木素-伊红(HE)染色第45-46页
     ·免疫组化第46-47页
     ·RNA 提取第47页
     ·反转录第47页
     ·荧光定量 PCR第47-49页
     ·组织 DNA 提取第49页
     ·蛋白免疫印迹 Western Blot第49-50页
     ·DNA 甲基化结合蛋白(MBD)方法富集甲基化 DNA第50-51页
     ·细胞增殖实验第51页
     ·细胞凋亡检测第51页
     ·Dot-blot 点杂交第51页
     ·统计分析第51-53页
第三章 结果第53-81页
   ·高剂量双酚 A 暴露对雄性小鼠生殖功能的传代影响及机制第53-74页
     ·高剂量双酚 A 对 F0、F1、F2 代小鼠精子数量的影响第53页
     ·高剂量双酚 A 对 F0、F1、F2 代小鼠精子形态的影响第53-54页
     ·高剂量双酚 A 对 F0、F1、F2 代小鼠睾丸组织形态学影响第54-55页
     ·高剂量双酚 A 对成年后雄鼠生育力和子代发育的影响第55-56页
     ·高剂量双酚 A 对 F0 代小鼠精子 DNA 甲基化谱的影响第56-60页
     ·高剂量双酚 A 对 F1 代小鼠精原细胞表达谱的影响第60-63页
     ·精子中 DNA 甲基化与精原细胞表达谱负相关分析第63-65页
     ·高剂量双酚 A 暴露对 F0 代小鼠精子中基因甲基化的影响第65-70页
     ·高剂量双酚 A 对 F0、F1 两代小鼠精子中 DNA 甲基化的影响第70-71页
     ·高剂量双酚 A 对 F0、F1 代小鼠睾丸基因表达水平的影响第71页
     ·高剂量双酚 A 对 F0 代小鼠睾丸 DNA 甲基化水平的影响第71-72页
     ·高剂量双酚 A 对 F0 代小鼠睾丸组蛋白甲基化水平的影响第72-73页
     ·5-AZA-dc 对小鼠精原细胞 GC-1 中 Tnnt2 基因甲基化和表达影响第73-74页
   ·低剂量双酚 A 暴露对小鼠雄性生殖功能的影响及机制第74-77页
     ·低剂量双酚 A 暴露对雄性生殖系统脏器指数及生育力的影响第74-75页
     ·低剂量双酚 A 暴露对小鼠精子数量的影响第75页
     ·低剂量双酚 A 对小鼠睾丸组织形态影响第75-76页
     ·低剂量双酚 A 对小鼠睾丸中基因 DNA 甲基化的影响第76页
     ·低剂量双酚 A 对 F1 代小鼠精子组蛋白甲基化修饰的影响第76-77页
   ·双酚 A 对小鼠精原干细胞 C18-4 细胞增殖及机制影响第77-81页
     ·双酚 A 对 C18-4 细胞增殖的影响第77页
     ·双酚 A 对 C18-4 细胞凋亡的影响第77-78页
     ·双酚 A 对 C18-4 细胞基因组整体甲基化水平的影响第78页
     ·双酚 A 对 C18-4 细胞组蛋白甲基化修饰的影响第78-81页
第四章 讨论第81-93页
   ·高剂量双酚 A 对连续三代雄性小鼠生精功能的影响第81-84页
   ·低剂量双酚 A 对雄性小鼠生精功能的影响第84-85页
   ·双酚 A 对小鼠生精功能不良作用传代的表观遗传学机制第85-89页
   ·双酚 A 作用的非单调剂量-效应第89-93页
第五章 结论第93-95页
参考文献第95-107页
附录第107-115页
 附录一 F0 代小鼠精子甲基化高通量测序分析相关数据第107-110页
 附录二 F1 代小鼠精原细胞表达谱分析相关数据第110-115页
在学期间取得的科研成果第115-119页
致谢第119页

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