| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-24页 |
| ·奶牛乳房炎分类 | 第10-11页 |
| ·隐性乳房炎 | 第10页 |
| ·临床型乳房炎 | 第10页 |
| ·感染性和非感染性乳房炎 | 第10-11页 |
| ·奶牛乳房炎的主要致病菌 | 第11-15页 |
| ·金黄色葡萄球菌 | 第11-12页 |
| ·无乳链球菌 | 第12-13页 |
| ·牛支原体 | 第13-14页 |
| ·大肠杆菌 | 第14-15页 |
| ·奶牛乳房炎的防制及检测技术 | 第15-19页 |
| ·乳汁体细胞检测法 | 第16页 |
| ·细菌学培养法 | 第16-17页 |
| ·PCR相关检测法 | 第17-19页 |
| ·PCR技术综述 | 第17-18页 |
| ·单一PCR和多重PCR检测法 | 第18-19页 |
| ·实时PCR检测法 | 第19页 |
| ·乳样中细菌DNA提取技术研究进展 | 第19-22页 |
| ·苯酚—氯仿法 | 第20页 |
| ·核酸纯化柱法 | 第20-21页 |
| ·磁珠法 | 第21页 |
| ·Chelex-100法 | 第21-22页 |
| ·多重PCR技术综述 | 第22-23页 |
| ·引物设计 | 第22页 |
| ·多重PCR的体系浓度 | 第22页 |
| ·多重PCR的循环参数 | 第22-23页 |
| ·多重PCR的优化 | 第23页 |
| ·选题的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 CHELEX-100法直接提取乳样中奶牛乳房炎主要致病菌DNA方法的建立 | 第24-31页 |
| ·试验材料 | 第24-25页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·主要溶液的配制 | 第24-25页 |
| ·试验方法 | 第25-28页 |
| ·Chelex-100法直接提取牛乳中细菌DNA | 第25-26页 |
| ·引物设计与合成 | 第26页 |
| ·PCR反应 | 第26页 |
| ·菌落形成单位测定 | 第26-28页 |
| ·含不同CFU乳样的制备和敏感性试验 | 第28页 |
| ·PCR产物的测序 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-30页 |
| ·菌落形成单位计数报告 | 第28-29页 |
| ·Chelex-100法直接提取乳样中4种细菌DNA的PCR敏感性 | 第29-30页 |
| ·测序序列结果分析 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| 3 奶牛乳房炎4种主要致病菌多重PCR检测方法的建立与应用 | 第31-43页 |
| ·试验材料 | 第31-32页 |
| ·菌株 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31-32页 |
| ·主要溶液的配制 | 第32页 |
| ·乳样的采集 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32-35页 |
| ·细菌DNA的提取 | 第32页 |
| ·乳样细菌DNA的提取 | 第32页 |
| ·引物 | 第32-33页 |
| ·单一PCR条件的优化 | 第33页 |
| ·多重PCR条件的优化 | 第33-34页 |
| ·多重PCR的特异性试验 | 第34页 |
| ·含不同CFU乳样的制备和多重PCR检测方法的敏感性试验 | 第34页 |
| ·临床乳样细菌的多重PCR的检测 | 第34页 |
| ·临床乳样细菌的分离培养与鉴定 | 第34-35页 |
| ·鉴定结果的比较分析 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-42页 |
| ·单一PCR条件和多重PCR条件的优化 | 第35-36页 |
| ·多重PCR的特异性试验 | 第36-37页 |
| ·多重PCR检测人工制备乳样的敏感性试验 | 第37-39页 |
| ·临床乳样细菌的培养法与多重PCR法检测结果 | 第39-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 4 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 作者简介 | 第49页 |
