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马铃薯StNPR2启动子和cDNA的克隆及其表达载体的构建

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
缩略词表第8-9页
1 引言第9-16页
   ·植物抗病机制第9-14页
     ·MAMP触发的免疫(MTI)第9-11页
     ·效应蛋白触发的免疫(ETI)第11-12页
     ·系统获得抗性(SAR)第12-13页
     ·RNAi介导的病毒防御第13-14页
   ·NPR1概述第14-15页
     ·NPR1及其作用机制第14-15页
     ·NPR1的应用第15页
     ·NPR1的同源基因及研究第15页
   ·马铃薯病害第15-16页
   ·本研究目的和意义第16页
2 材料与方法第16-29页
   ·材料第16-17页
     ·植物材料与载体第16页
     ·酶及试剂盒第16页
     ·实验中用到的引物第16-17页
   ·方法第17-29页
     ·马铃薯培养第17页
     ·生物信息学分析第17页
     ·BTH诱导StNPR2基因表达分析第17-18页
     ·DNA的提取第18页
     ·Total RNA提取第18-19页
     ·反转录cDNA的合成第19页
     ·马铃薯启动子StproNPR2的克隆第19-23页
       ·PCR扩增StproNPR2启动子第19-20页
       ·StproNPR2启动子连接L16载体及酶切鉴定第20-23页
     ·马铃薯StNPR2 cDNA的克隆及测序第23-25页
       ·PCR扩增马铃薯StNPR2 cDNA第23-24页
       ·StNPR2连接pMD19-T载体及酶切鉴定第24-25页
     ·构建由StproNPR2驱动的StNPR2双元表达载体第25-29页
       ·StproNPR2-StNPR2连接L16载体及酶切鉴定第25-27页
       ·StproNPR2-StNPR2连接 pORE 04 载体及酶切鉴定第27-28页
       ·P2-N2-O4转化根癌农杆菌第28-29页
3 结果与分析第29-39页
   ·生物信息学分析第29-33页
     ·启动子StproNPR2序列分析第29-31页
     ·StNPR2氨基酸序列分析及蛋白结构分析第31-32页
     ·StNPR2氨基酸序列的同源性比较及系统进化分析第32-33页
   ·BTH诱导StNPR2基因的表达情况第33-34页
   ·StproNPR2启动子克隆及鉴定第34-35页
     ·StproNPR2启动子PCR扩增第34页
     ·StproNPR2-L16载体构建第34-35页
   ·StNPR2 cDNA克隆及鉴定第35-37页
     ·马铃薯总RNA提取及反转录第35-36页
     ·StNPR2 cDNA PCR扩增第36页
     ·StNPR2-pMD19-T载体构建第36-37页
   ·双元表达载体的构建第37-39页
     ·StproNPR2-StNPR2-L16载体构建第37-38页
     ·StproNPR2-StNPR2-O4载体构建第38页
     ·StproNPR2-StNPR2-O4载体转化根癌农杆菌第38-39页
4 讨论第39-40页
5 结论第40-42页
致谢第42-43页
参考文献第43-48页
作者简介第48页

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