| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 纤维素及纤维素的生物合成 | 第11-17页 |
| ·纤维素的结构与功能 | 第11页 |
| ·纤维素的生物合成 | 第11-12页 |
| ·植物纤维素合成酶研究进展 | 第12-14页 |
| ·CesA基因的表达及其调控 | 第14-15页 |
| ·纤维素的生物合成是多个纤维素合成酶基因协同作用的结果 | 第15-17页 |
| ·苎麻纤维素合成酶基因的研究进展 | 第17页 |
| 2 本研究的目的、意义和主要内容 | 第17-19页 |
| 第二章 BnCesA基因家族cDNA的克隆及序列分析 | 第19-50页 |
| 1 材料与试剂 | 第19页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·菌株 | 第19页 |
| 2 实验方法 | 第19-30页 |
| ·苎麻RNA提取及质量检测 | 第19-20页 |
| ·逆转录合成cDNA第一链 | 第20页 |
| ·苎麻纤维素合成酶基因核心片段的克隆 | 第20-25页 |
| ·基于转录组的苎麻纤维素合成酶核心片段的发掘 | 第20-21页 |
| ·PCR反应体系及程序 | 第21-22页 |
| ·PCR产物的凝胶电泳及目的条带的回收 | 第22页 |
| ·加尾反应 | 第22页 |
| ·加尾产物的纯化 | 第22页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体连接 | 第22页 |
| ·大肠杆菌感受态的制作及热激转化 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第23页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第23-25页 |
| ·利用3’RACE技术扩增cDNA 3’末端序列 | 第25-26页 |
| ·3’RACE的原理 | 第25页 |
| ·3’RACE的实验步骤 | 第25-26页 |
| ·利用5’RACE技术扩增cDNA 5’末端序列 | 第26-30页 |
| ·5’RACE原理 | 第26页 |
| ·5’RACE扩增5’端序列 | 第26-30页 |
| ·苎麻纤维素合成酶基因(BnCesA)cDNA序列的生物信息学分析 | 第30页 |
| 3 实验结果 | 第30-47页 |
| ·总RNA的提取 | 第30页 |
| ·苎麻纤维素合成酶基因cDNA序列的克隆及生物信息学分析 | 第30-47页 |
| ·BnCesA2全长cDNA序列的克隆 | 第30-35页 |
| ·BnCesA4全长cDNA序列的克隆 | 第35-37页 |
| ·BnCesA5全长cDNA序列的克隆 | 第37-40页 |
| ·BnCesA6 cDNA序列的克隆 | 第40-41页 |
| ·BnCesA7 cDNA序列的克隆 | 第41-46页 |
| ·纤维素合成酶的系统发育树的构建 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| ·5’RACE技术 | 第47-48页 |
| ·CesA基因的序列分析 | 第48-50页 |
| 第三章 BnCesA基因在苎麻韧皮部及木质部表达分析 | 第50-58页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第50页 |
| 2 荧光定量PCR的实验原理 | 第50-51页 |
| 3 实验方法 | 第51-52页 |
| ·不同品种苎麻茎秆韧皮部和木质部荧光定量用cDNA样品的制备 | 第51页 |
| ·荧光定量引物的设计 | 第51页 |
| ·荧光定量反应体系的设置 | 第51-52页 |
| ·Real Time PCR反应 | 第52页 |
| 4 结果分析 | 第52-56页 |
| ·BnCesA2基因在不同品种苎麻韧皮部与木质部的表达 | 第52-53页 |
| ·BnCesA3基因在不同品种苎麻韧皮部与木质部的表达 | 第53-54页 |
| ·BnCesA4基因在不同品种苎麻韧皮部与木质部的表达 | 第54页 |
| ·BnCesA5基因在不同品种苎麻韧皮部与木质部的表达 | 第54-55页 |
| ·四种BnCesA基因在四个品种苎麻木质部及韧皮部中表达量的比较 | 第55-56页 |
| 5 讨论 | 第56-58页 |
| ·荧光定量PCR | 第56-57页 |
| ·BnCesA基因表达量与CesA复合体 | 第57-58页 |
| 第四章 结论与展望 | 第58-60页 |
| 1 论文结论 | 第58页 |
| 2 后续研究 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
