中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
前言 | 第9-13页 |
第一部分 试剂与材料 | 第13-20页 |
1、RYBP 穿梭质粒 | 第13页 |
2、第三代慢病毒包装系统 | 第13页 |
3. 主要仪器 | 第13-14页 |
4. 主要试剂及耗材 | 第14-15页 |
5. 主要试剂的配制 | 第15-20页 |
第二部分 研究方法及步骤 | 第20-32页 |
1、重组 RYBP 慢病毒质粒的构建和验证 | 第20-22页 |
2、包装病毒 | 第22-24页 |
3、慢病毒转染间充质干细胞 | 第24页 |
4、real-time PCR 测定 | 第24-27页 |
5、Western 验证 | 第27-31页 |
6、增殖和凋亡的测定 | 第31-32页 |
第三部分 结果 | 第32-36页 |
1、重组慢病毒载体质粒经构建后予挑菌(可挑多份单克隆)、摇菌、小提质粒、PCR 扩增后予 PCR 检测 | 第32页 |
2. 慢病毒稳定感染 HL-60 细胞的获得 | 第32-33页 |
3. 荧光定量 PCR 检测各处理组细胞中 RYBP 基因的表达水平 | 第33-34页 |
4. Western blot 检测各实验组细胞中 RYBP 的表达水平 | 第34页 |
5. 感染 RYBP 对间充质干细胞增殖影响 | 第34-35页 |
6. 流式细胞术检测各实验组细胞凋亡率 | 第35-36页 |
第四部分 讨论 | 第36-39页 |
参考文献 | 第39-41页 |
综述 | 第41-47页 |
参考文献 | 第45-47页 |
全文结论 | 第47-48页 |
研究生期间参与科研及发表论文 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |