固定化肌酸激酶连续制备分离磷酸肌酸
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 1 概述 | 第7-14页 |
| ·磷酸肌酸的用途 | 第7-8页 |
| ·固定化酶研发现状 | 第8-12页 |
| ·固定化酶技术简介及优点 | 第8-9页 |
| ·固定化酶方法及固定化酶载体的研究现状 | 第9-12页 |
| ·本课题的选题背景及意义 | 第12-14页 |
| 2 实验原理 | 第14-19页 |
| ·制备固定化肌酸激酶原理 | 第14页 |
| ·肌酸激酶的催化机理 | 第14页 |
| ·离子交换分离磷酸肌酸的原理 | 第14-16页 |
| ·固定化酶反应-磷酸肌酸分离耦合原理 | 第16页 |
| ·高效液相色谱法 | 第16-17页 |
| ·红外光谱 | 第17-18页 |
| ·核磁共振 | 第18-19页 |
| 3 实验仪器及试剂 | 第19-21页 |
| ·实验仪器 | 第19-20页 |
| ·实验试剂 | 第20-21页 |
| 4 实验方法 | 第21-28页 |
| ·赖氨酸修饰交联壳聚糖微球 | 第21-22页 |
| ·制备交联壳聚糖树脂 | 第21页 |
| ·制备交联壳聚糖-赖氨酸树脂 | 第21-22页 |
| ·固定化肌酸激酶的制备 | 第22-24页 |
| ·试剂配制 | 第22页 |
| ·制备肌酸激酶 | 第22页 |
| ·制备固定化酶 | 第22-23页 |
| ·固定化酶活力测定 | 第23-24页 |
| ·肌酸激酶动力学参数的测定 | 第24页 |
| ·磷酸肌酸的制备与分离 | 第24-27页 |
| ·选择阴离子交换树脂 | 第24-25页 |
| ·静态交换 | 第25-26页 |
| ·洗脱实验 | 第26页 |
| ·动态交换 | 第26页 |
| ·制备磷酸肌酸 | 第26-27页 |
| ·磷酸肌酸钠的精制 | 第27-28页 |
| 5 结果与讨论 | 第28-49页 |
| ·制备固定化肌酸激酶的优化工艺 | 第28-33页 |
| ·pH 值的影响 | 第28-29页 |
| ·交联时间 | 第29-30页 |
| ·酶摩尔用量比 | 第30-31页 |
| ·戊二醛与载体游离氨基摩尔比 | 第31-33页 |
| ·固定化酶酶学性质 | 第33-39页 |
| ·Km 值 | 第33-34页 |
| ·最适 pH | 第34-35页 |
| ·最适反应温度 | 第35-36页 |
| ·重复使用稳定性 | 第36-37页 |
| ·热稳定性 | 第37-38页 |
| ·贮存稳定性 | 第38-39页 |
| ·固定化酶反应器连续反应生成磷酸肌酸的优化工艺 | 第39-43页 |
| ·离子交换树脂的选择 | 第39-40页 |
| ·底物浓度对反应的影响 | 第40-41页 |
| ·流速对反应的影响 | 第41-42页 |
| ·连续制备磷酸肌酸 | 第42页 |
| ·柱式动态洗脱 | 第42-43页 |
| ·磷酸肌酸钠的分离纯化 | 第43-44页 |
| ·连续合成、分离磷酸肌酸工艺的耦合性的主要参数 | 第44-46页 |
| ·磷酸肌酸钠的表征 | 第46-49页 |
| ·核磁共振谱图分析 | 第46-47页 |
| ·红外谱图分析 | 第47-48页 |
| ·高效液相色谱 | 第48-49页 |
| 6 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录 | 第56页 |
| A. 作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第56页 |
| B. 作者在攻读硕士学位期间取得的科研成果目录 | 第56页 |
