| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-43页 |
| 1.海洋真菌的研究进展 | 第12-18页 |
| ·海洋真菌的概述 | 第12-14页 |
| ·海洋真菌代谢产物的多样性 | 第14-18页 |
| 2 纤维素酶研究进展 | 第18-24页 |
| ·纤维素酶概述 | 第19-20页 |
| ·外切葡聚糖酶结构和作用机理 | 第20-22页 |
| ·外切葡聚糖酶分子生物学研究 | 第22-24页 |
| 3.半纤维素酶研究进展 | 第24-28页 |
| ·木聚糖酶概述 | 第25-26页 |
| ·木聚糖酶分子生物学研究进展 | 第26-28页 |
| 4.丝状真菌基因克隆策略 | 第28-32页 |
| ·已知基因编码产物基因克隆策略 | 第28-29页 |
| ·未知基因编码产物基因克隆策略 | 第29-31页 |
| ·电子克隆策略 | 第31-32页 |
| 5.丝状真菌基因表达调控 | 第32-41页 |
| ·丝状真菌启动子 | 第33-39页 |
| ·丝状真菌反式作用因子 | 第39-41页 |
| 6.本论文研究工作及意义 | 第41-43页 |
| 第二章 适冷海洋真菌的分离及培养条件的优化 | 第43-61页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料和方法 | 第43-50页 |
| ·样品采集 | 第43页 |
| ·菌株和质粒 | 第43页 |
| ·分子克隆用酶及试剂 | 第43-44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·仪器 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-50页 |
| ·结果和分析 | 第50-60页 |
| ·产纤维素酶低温海洋真菌的分离 | 第50-51页 |
| ·适冷海洋青霉FS010形态鉴定 | 第51页 |
| ·适冷FS010菌株的分子鉴定 | 第51-54页 |
| ·适冷产黄青霉FS010产纤维素酶培养条件优化 | 第54-59页 |
| ·适冷海洋青霉外切葡聚糖酶酶学性质 | 第59-60页 |
| ·本章小结 | 第60-61页 |
| 第三章 适冷产黄青霉外切葡聚糖酶基因克隆和表达 | 第61-89页 |
| ·引言 | 第61页 |
| ·材料与方法 | 第61-70页 |
| ·菌株和质粒 | 第61-62页 |
| ·分子克隆用酶及试剂 | 第62页 |
| ·培养基组成 | 第62页 |
| ·仪器 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-70页 |
| ·实验结果 | 第70-87页 |
| ·FS010 cbh1基因片段的克隆 | 第70-73页 |
| ·TAIL-PCR扩增cbh1基因5’端序列 | 第73-75页 |
| ·TAIL-PCR扩增cbh1基因3’端序列 | 第75-76页 |
| ·cbh1全长基因的克隆 | 第76-78页 |
| ·cbh1拷贝数的确定 | 第78页 |
| ·cbh1 cDNA基因克隆 | 第78-81页 |
| ·氨基酸序列分析与同源性比较 | 第81-83页 |
| ·外切葡聚糖酶同源模建 | 第83-84页 |
| ·不同碳源对cbh1表达的影响 | 第84-85页 |
| ·cbh1 cDNA在酿酒酵母中的组成性表达 | 第85-87页 |
| ·讨论 | 第87-88页 |
| ·本章小结 | 第88-89页 |
| 第四章 适冷产黄青霉FS010外切葡聚糖基因上游调控序列的分离及功能性分析 | 第89-107页 |
| ·引言 | 第89-90页 |
| ·材料和方法 | 第90-95页 |
| ·菌株、质粒和培养基 | 第90-91页 |
| ·常规的重组DNA技术 | 第91页 |
| ·产黄青霉cbh1启动子的克隆 | 第91-92页 |
| ·报告质粒pcbh1及缺失报告质粒的构建 | 第92页 |
| ·产黄青霉原生质体制备和转化 | 第92-93页 |
| ·转化子染色体快速提取 | 第93页 |
| ·转化子PCR验证 | 第93-94页 |
| ·转化子杂交验证 | 第94页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第94页 |
| ·GUS活性测定 | 第94-95页 |
| ·结果和讨论 | 第95-105页 |
| ·TAIL-PCR分离cbh1启动子序列 | 第95-96页 |
| ·cbh1启动子序列功能元件分析 | 第96-100页 |
| ·FS010 cbh1启动子活性的鉴定 | 第100-104页 |
| ·启动子的定向缺失分析 | 第104-105页 |
| ·本章小结 | 第105-107页 |
| 第五章 适冷产黄青霉低温木聚糖酶基因的克隆和表达 | 第107-122页 |
| ·引言 | 第107页 |
| ·材料和方法 | 第107-112页 |
| ·菌株、质粒 | 第107页 |
| ·试剂 | 第107页 |
| ·常规DNA重组技术 | 第107-108页 |
| ·FS010低温木聚糖酶基因的克隆 | 第108页 |
| ·FS010低温木聚糖酶cDNA的克隆 | 第108-109页 |
| ·低温木聚糖酶基因xyl在大肠杆菌的表达和分离纯化 | 第109-111页 |
| ·蛋白质技术 | 第111页 |
| ·木聚糖酶活性的测定 | 第111-112页 |
| ·结果和讨论 | 第112-120页 |
| ·适冷产黄青霉FS010木聚糖酶染色体基因的克隆 | 第112页 |
| ·低温木聚糖酶cDNA基因的克隆 | 第112-114页 |
| ·FS010低温木聚糖酶cDNA基因的序列分析 | 第114-116页 |
| ·产黄青霉低温木聚糖酶cDNA基因的外源表达和纯化 | 第116-117页 |
| ·重组低温木聚糖酶的酶学性质 | 第117-120页 |
| ·讨论 | 第120-121页 |
| ·本章小结 | 第121-122页 |
| 全文总结 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-132页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第132-133页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第133页 |
