中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-34页 |
一.Akt蛋白功能研究进展 | 第10-21页 |
1. 蛋白激酶Akt的起源 | 第10-11页 |
2. 蛋白激酶Akt的结构特点 | 第11-12页 |
3. 蛋白激酶Akt的组织分布及表达 | 第12页 |
4. 蛋白激酶Akt的抑制剂 | 第12-13页 |
5. 蛋白激酶Akt的上游-PI3K信号 | 第13-16页 |
·PI3K信号通路概述 | 第13-15页 |
·PTEN对PI3K/Akt信号的负调控 | 第15页 |
·PDK1是Akt的上游信号蛋白 | 第15-16页 |
6. 蛋白激酶Akt的下游底物 | 第16-17页 |
·Bcl2家族成员BAD | 第16页 |
·糖原合成激酶3(GSK-3) | 第16-17页 |
·转录因子E2F | 第17页 |
·FRAP | 第17页 |
7. 蛋白激酶Akt的生物学功能 | 第17-19页 |
·Akt对脑组织的保护作用 | 第17-18页 |
·Akt对心肌的保护作用 | 第18页 |
·Akt对神经元存活的保护作用 | 第18-19页 |
8. Akt与病毒感染 | 第19-21页 |
·Akt与潜伏感染 | 第19-20页 |
·Akt与HBV的慢性感染 | 第20-21页 |
二.细胞自噬 | 第21-34页 |
1. 自噬概述 | 第21-22页 |
2. 自噬的发生过程 | 第22-26页 |
·自噬的激活 | 第23页 |
·自噬体的形成 | 第23-25页 |
·自噬小体与溶酶体的融合 | 第25页 |
·降解 | 第25-26页 |
3. 自噬的相关信号调控 | 第26-29页 |
·mTOR信号通路 | 第26-27页 |
·ERK信号通路 | 第27-28页 |
·GSK3β相关信号通路 | 第28页 |
·P38信号通路 | 第28-29页 |
4. 细胞自噬和病毒感染 | 第29-31页 |
·DNA病毒 | 第29-30页 |
·RNA病毒 | 第30-31页 |
5. HBV和细胞自噬 | 第31-34页 |
第二部分 实验部分 | 第34-58页 |
第一章 Akt磷酸化对HBV稳定转染细胞系自噬的调节 | 第34-44页 |
摘要 | 第34页 |
1. 引言 | 第34-35页 |
2. 材料与方法 | 第35-37页 |
·材料 | 第35-36页 |
·细胞培养及药物处理 | 第36页 |
·转染GFP-LC3质粒,制作荧光片子 | 第36页 |
·电镜样品制备 | 第36页 |
·免疫印迹检测 | 第36-37页 |
3. 结果 | 第37-41页 |
·HBV基因组稳定转染细胞Akt磷酸化提高 | 第37-38页 |
·抑制Akt磷酸化HepG2.215细胞自噬降低 | 第38-39页 |
·抑制Akt磷酸化降低了Beclin1的表达 | 第39-40页 |
·抑制Akt磷酸化降低了ERK1/2的磷酸化 | 第40-41页 |
·抑制Akt磷酸化降低了GSK3的磷酸化 | 第41页 |
4. 讨论 | 第41-44页 |
第二章 真菌次级代谢产物C77影响细胞自噬和HBV复制 | 第44-58页 |
摘要 | 第44-45页 |
1. 引言 | 第45-46页 |
2. 材料与方法 | 第46-47页 |
·材料 | 第46-47页 |
3. 实验方法 | 第47-49页 |
·细胞培养及药物处理 | 第47页 |
·细胞转染 | 第47页 |
·细胞传代 | 第47-48页 |
·细胞复苏及冻存 | 第48页 |
·免疫印迹检测 | 第48-49页 |
·实时定量PCR(Real time PCR)分析 | 第49页 |
·上清中HBsAg检测 | 第49页 |
·siRNA干扰敲降基因 | 第49页 |
·自噬体形成定量分析 | 第49页 |
4. 实验结果 | 第49-55页 |
·真菌次级代谢产物C77引起细胞自噬 | 第49-51页 |
·敲降Akt影响HBV复制 | 第51-52页 |
·抑制Akt减少自噬体和HBV-X的转录 | 第52-53页 |
·C77降低自噬基因表达并抑制HBV-X的转录 | 第53-54页 |
·敲降自噬相关基因抑制HBV-X转录 | 第54-55页 |
5. 讨论 | 第55-58页 |
全文总结 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-80页 |
缩略词表 | 第80-82页 |
发表文章目录 | 第82-84页 |
致谢 | 第84页 |