| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-15页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 1 文献综述 | 第17-44页 |
| ·核受体蛋白AhR概述 | 第17-30页 |
| ·AhR蛋白的结构 | 第17-18页 |
| ·ARNT蛋白的结构 | 第18-19页 |
| ·AhR信号通路 | 第19-20页 |
| ·核受体AhR参与的细胞信号通路 | 第20-30页 |
| ·蛋白质的翻译后修饰 | 第30-36页 |
| ·磷酸化修饰 | 第31-32页 |
| ·蛋白质的甲基化修饰 | 第32-34页 |
| ·蛋白质的泛素化修饰 | 第34-36页 |
| ·SUMO与SUMO化修饰 | 第36-42页 |
| ·SUMO蛋白家族 | 第36-37页 |
| ·SUMO化修饰的分子机制 | 第37-39页 |
| ·SUMO化修饰的功能 | 第39-42页 |
| ·本论文的选题依据和研究内容 | 第42-44页 |
| ·选题依据 | 第42页 |
| ·研究内容 | 第42-44页 |
| 2 AhR的SUMO化修饰 | 第44-54页 |
| ·引言 | 第44页 |
| ·仪器与试剂 | 第44-47页 |
| ·仪器 | 第44-45页 |
| ·试剂 | 第45-47页 |
| ·实验方法 | 第47-51页 |
| ·细胞培养 | 第47页 |
| ·质粒表达载体的细胞转染 | 第47-48页 |
| ·Western blotting(WB)实验 | 第48-50页 |
| ·免疫共沉淀(IP)实验 | 第50-51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-53页 |
| ·MCF-7细胞中外源转染Flag-AhR载体的表达 | 第51页 |
| ·MCF-7细胞中外源转染AhR的SUMO化修饰 | 第51-52页 |
| ·MCF-7细胞中内源AhR的SUMO化修饰 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 3 K63和K510是AhR的主要SUMO化位点 | 第54-63页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·仪器与试剂 | 第54-56页 |
| ·仪器 | 第54页 |
| ·试剂 | 第54-56页 |
| ·实验方法 | 第56-58页 |
| ·突变体的质粒转化 | 第56-57页 |
| ·质粒提取 | 第57页 |
| ·细胞培养 | 第57页 |
| ·质粒表达载体的细胞转染 | 第57-58页 |
| ·Western blotting实验 | 第58页 |
| ·蛋白质定量实验(考马斯亮蓝法) | 第58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-62页 |
| ·K63和K510是AhR潜在的SUMO化位点 | 第58-59页 |
| ·AhR的SUMO化位点突变体的构建 | 第59-60页 |
| ·AhR的SUMO化位点突变体的表达 | 第60页 |
| ·K63和K510是AhR的主要SUMO化位点 | 第60-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 4 SENP1介导了AhR的去SUMO化过程 | 第63-73页 |
| ·引言 | 第63页 |
| ·仪器与试剂 | 第63-66页 |
| ·仪器 | 第63-64页 |
| ·试剂 | 第64-66页 |
| ·实验方法 | 第66-69页 |
| ·细胞培养 | 第66页 |
| ·质粒提取 | 第66-67页 |
| ·质粒表达载体的细胞转染 | 第67页 |
| ·Western blotting实验 | 第67页 |
| ·蛋白质定量实验(考马斯亮蓝法) | 第67-68页 |
| ·双荧光素酶报告基因检测 | 第68-69页 |
| ·结果与讨论 | 第69-72页 |
| ·SENP1介导了AhR的去SUMO化过程 | 第69-70页 |
| ·SENP1调节AhR的转录活性 | 第70-72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 5 TCDD调节AhR的SUMO化修饰 | 第73-80页 |
| ·引言 | 第73页 |
| ·仪器与试剂 | 第73页 |
| ·仪器 | 第73页 |
| ·试剂 | 第73页 |
| ·实验方法 | 第73-75页 |
| ·细胞培养 | 第74页 |
| ·质粒表达载体的细胞转染 | 第74页 |
| ·核质分离实验 | 第74页 |
| ·Western blotting实验 | 第74-75页 |
| ·IP实验 | 第75页 |
| ·实验结果 | 第75-79页 |
| ·TCDD抑制AhR的SUMO化修饰 | 第75页 |
| ·TCDD以时间依赖的方式降低AhR的SUMO化 | 第75-77页 |
| ·TCDD主要降低细胞核内AhR的SUMO化修饰 | 第77-78页 |
| ·TCDD降低细胞核内AhR与SUMO1的共定位 | 第78-79页 |
| ·小结 | 第79-80页 |
| 6 SUMO通过抑制泛素通路提高AhR的稳定性 | 第80-85页 |
| ·引言 | 第80页 |
| ·仪器与试剂 | 第80页 |
| ·仪器 | 第80页 |
| ·试剂 | 第80页 |
| ·实验方法 | 第80-81页 |
| ·细胞培养 | 第80-81页 |
| ·放线菌酮(CHX)处理细胞 | 第81页 |
| ·MG132处理细胞 | 第81页 |
| ·质粒表达载体的细胞转染 | 第81页 |
| ·Western blotting实验 | 第81页 |
| ·IP实验 | 第81页 |
| ·结果与讨论 | 第81-84页 |
| ·SUMO化提高AhR的稳定性 | 第81-83页 |
| ·SUMO化抑制AhR的泛素化通路 | 第83-84页 |
| ·小结 | 第84-85页 |
| 7 SUMO化修饰对AhR转录活性的调控作用 | 第85-89页 |
| ·引言 | 第85页 |
| ·仪器与试剂 | 第85页 |
| ·仪器 | 第85页 |
| ·试剂 | 第85页 |
| ·实验方法 | 第85-86页 |
| ·细胞培养 | 第85页 |
| ·质粒表达载体的细胞转染 | 第85页 |
| ·Western blotting实验 | 第85页 |
| ·IP实验 | 第85-86页 |
| ·荧光素酶报告基因实验 | 第86页 |
| ·结果与讨论 | 第86-88页 |
| ·SUMO化修饰抑制AhR介导的转录激活过程 | 第86-87页 |
| ·SUMO化以剂量依赖性方式抑制AhR的转录活性 | 第87-88页 |
| ·小结 | 第88-89页 |
| 结论与展望 | 第89-91页 |
| 结论 | 第89-90页 |
| 展望 | 第90-91页 |
| 创新点摘要 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-98页 |
| 附录A 主要质粒图谱 | 第98-101页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简介 | 第103-104页 |