论文创新点 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
中英文缩略对照表 | 第11-16页 |
第一章 锌指蛋白概述 | 第16-27页 |
·引言 | 第16-17页 |
·锌指蛋白的发现 | 第17-18页 |
·锌指蛋白简介 | 第18-19页 |
·C2H2型锌指蛋白 | 第19-25页 |
·C2H2型锌指基序的结构及其DNA结合活性 | 第19-21页 |
·C2H2型锌指蛋白的分类 | 第21-23页 |
·C2H2型锌指蛋白的生化功能 | 第23-25页 |
·C2H2型锌指蛋白的应用 | 第25-27页 |
第二章 KRAB型锌指蛋白概述及ZNF268与ZNF300研究进展 | 第27-60页 |
·引言 | 第27-28页 |
·KRAB结构域简介 | 第28-31页 |
·KRAB结构域的一般构成 | 第28-29页 |
·KRAB结构域的转录抑制功能 | 第29-30页 |
·KRAB结构域转录抑制功能的机制 | 第30-31页 |
·KRAB型锌指蛋白的核定位 | 第31-40页 |
·大分子物质的核运输 | 第31-39页 |
·KRAB锌指蛋白的锌指结构域发挥核定位功能 | 第39-40页 |
·KRAB型锌指蛋白的功能 | 第40-50页 |
·KRAB锌指蛋白与器官发育 | 第40-41页 |
·KRAB锌指蛋白与造血分化 | 第41-49页 |
·KRAB锌指蛋白与疾病 | 第49-50页 |
·ZNF268的研究进展 | 第50-54页 |
·ZNF268基因的结构特点 | 第50-52页 |
·ZNF268基因的功能 | 第52-54页 |
·ZNF300的研究进展 | 第54-60页 |
·ZNF300的基因结构 | 第54-55页 |
·ZNF300基因的表达谱 | 第55-56页 |
·ZNF300基因下游靶标基因的核心结合序列 | 第56页 |
·ZNF300基因的功能 | 第56-60页 |
第三章 锌指蛋白KRAB结构域入核功能研究 | 第60-99页 |
摘要 | 第60页 |
·引言 | 第60-62页 |
·实验材料与仪器 | 第62-66页 |
·实验材料 | 第62-65页 |
·实验仪器 | 第65-66页 |
·实验方法 | 第66-82页 |
·细胞总RNA的提取 | 第66页 |
·反转录cDNA第一链的合成 | 第66-67页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第67页 |
·载体构建 | 第67-74页 |
·细胞培养 | 第74-75页 |
·细胞转染 | 第75-76页 |
·Confocal实验 | 第76-77页 |
·GST pull-down实验 | 第77-78页 |
·Western Blot实验 | 第78-81页 |
·Co-IP实验 | 第81-82页 |
·实验结果 | 第82-97页 |
·KRAB结构域入核功能的普遍性 | 第82-87页 |
·KRAB结构域入核功能的关键氨基酸位点 | 第87-91页 |
·KRAB结构入核机制研究 | 第91-97页 |
·讨论 | 第97-99页 |
第四章 ZNF300促进K562细胞诱导分化的功能研究 | 第99-135页 |
摘要 | 第99页 |
·引言 | 第99-100页 |
·实验材料与仪器 | 第100-104页 |
·实验材料 | 第100-104页 |
·实验仪器 | 第104页 |
·实验方法 | 第104-115页 |
·悬浮细胞培养 | 第104-105页 |
·细胞计数 | 第105页 |
·悬浮细胞诱导分化 | 第105页 |
·流式细胞仪检测细胞表面分子的比例 | 第105-106页 |
·瑞氏-吉姆萨染色 | 第106页 |
·实时定量RT-PCR | 第106-108页 |
·Western Blot | 第108页 |
·Benzidine染色 | 第108页 |
·下调ZNF300表达的shRNA载体构建 | 第108-112页 |
·慢病毒颗粒的包装 | 第112-113页 |
·慢病毒颗粒感染细胞及筛选稳转细胞系 | 第113页 |
·嘌呤霉素杀灭曲线的确定 | 第113-114页 |
·悬浮细胞电转筛选稳转细胞系 | 第114页 |
·DAPI染色检测细胞周期变化 | 第114-115页 |
·实验结果 | 第115-133页 |
·ZNF300基因在K562细胞向巨核系诱导分化过程中的变化 | 第115-118页 |
·ZNF300基因在K562细胞向红系分化过程中的表达变化 | 第118-121页 |
·特异性下调ZNF300基因表达的shRNA慢病毒载体构建 | 第121-124页 |
·下调ZNF300表达的稳转细胞系的构建 | 第124-126页 |
·ZNF300基因的表达下调之后对巨核系分化的影响 | 第126-128页 |
·ZNF300基因的表达下调之后对红系分化的影响 | 第128-130页 |
·ZNF300基因的表达下调之后对细胞增殖的影响 | 第130-131页 |
·ZNF300基因的表达下调对细胞周期的影响 | 第131-133页 |
·讨论 | 第133-135页 |
第五章 小鼠胚胎发育全基因组表达谱芯片分析 | 第135-152页 |
摘要 | 第135页 |
·引言 | 第135-137页 |
·实验材料与方法 | 第137-141页 |
·实验材料 | 第137-138页 |
·实验方法 | 第138-141页 |
·实验结果与数据分析 | 第141-150页 |
·小鼠胚胎发育过程中基因表达概况 | 第141-143页 |
·差异基因的表达模式和功能分析 | 第143-149页 |
·基因使用效率的不同反应物种进化上的差异 | 第149-150页 |
·讨论 | 第150-152页 |
研究总结与展望 | 第152-155页 |
参考文献 | 第155-178页 |
博士研究生期间发表及待发表的论文 | 第178-180页 |
致谢 | 第180-182页 |