| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 引言与文献综述 | 第10-20页 |
| ·大肠杆菌 | 第10-12页 |
| ·大肠杆菌形态和生理特征 | 第10页 |
| ·肠毒素大肠杆菌(ETEC)国内外研究概况 | 第10-11页 |
| ·ETEC菌毛 | 第11页 |
| ·ETEC的危害 | 第11-12页 |
| ·适配体 | 第12-17页 |
| ·适配体概述 | 第12页 |
| ·适配体与靶分子的结合原理 | 第12-13页 |
| ·适配体的筛选(SELEX技术) | 第13-15页 |
| ·适配体的优势 | 第15-16页 |
| ·适配体的化学修饰 | 第16页 |
| ·适配体用于微生物检测 | 第16-17页 |
| ·本课题研究的工作思路 | 第17-20页 |
| 第二章 SELEX筛选ETEC K88菌毛蛋白适配体方法的建立 | 第20-32页 |
| ·实验仪器与材料 | 第20-23页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·随机ssDNA文库的构建以及引物合成 | 第21页 |
| ·主要试剂配制 | 第21-22页 |
| ·其他试剂 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-26页 |
| ·ETEC K88菌毛蛋白的制备 | 第23-24页 |
| ·不对称PCR条件优化 | 第24-25页 |
| ·SELEX过程 | 第25-26页 |
| ·计算ssDNA结合率 | 第26页 |
| ·实验结果与讨论 | 第26-29页 |
| ·SDS-PAGE结果 | 第26-27页 |
| ·PCR条件的优化 | 第27-28页 |
| ·ETEC K88菌毛蛋白与ssDNA富集的SELEX筛选 | 第28-29页 |
| ·ssDNA文库与ETEC K88菌毛蛋白的结合率测定 | 第29页 |
| ·总结 | 第29-32页 |
| 第三章 适配体的克隆、测序 | 第32-43页 |
| ·实验仪器与材料 | 第32-34页 |
| ·主要仪器 | 第32-33页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·第11轮筛选产物的扩增和纯化 | 第34-35页 |
| ·PCR纯化产物的克隆 | 第35-36页 |
| ·测序 | 第36-37页 |
| ·适配体序列分析 | 第37页 |
| ·实验结果与讨论 | 第37-42页 |
| ·克隆适配体一级结构序列同源性分析 | 第37-40页 |
| ·筛选适配体二级结构预测 | 第40-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第四章 适配体的鉴定、分析及应用 | 第43-53页 |
| ·实验仪器和材料 | 第43-44页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·菌体处理 | 第44-45页 |
| ·ssDNA文库解离常数的计算 | 第45页 |
| ·适配体与细菌的结合分析 | 第45-46页 |
| ·荧光共聚焦成像分析 | 第46页 |
| ·实验结果与讨论 | 第46-52页 |
| ·ssDNA文库的KD值 | 第46-48页 |
| ·四个家族代表序列的KD值 | 第48页 |
| ·适配体定量检测ETEC K88 | 第48-50页 |
| ·适配体对ETEC K88的定性检测 | 第50-51页 |
| ·荧光共聚焦成像分析 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第五章 结论 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-68页 |
| 本文缩略词表 | 第68-69页 |
| 攻读硕士学位期间撰写、发表的学术论文 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
