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马铃薯SGAs合成相关基因表达及其SGT3启动子功能研究

摘要第1-3页
Summary第3-4页
缩略语表第4-5页
目录第5-7页
第一章 文献综述第7-21页
   ·糖苷生物碱概况第7-14页
     ·SGAs 种类及其分布第7-11页
     ·SGAs 的作用第11-13页
       ·糖苷生物碱的毒性第11-12页
       ·糖苷生物碱对马铃薯病虫害的防御作用第12页
       ·糖苷生物碱对病原菌的抑制作用第12-13页
       ·糖苷生物碱对害虫的驱拒性第13页
     ·影响因素第13-14页
   ·糖苷生物碱合成途径第14-16页
     ·萜类合成第14-15页
     ·甾醇类合成第15-16页
     ·茄啶的合成第16页
   ·SGAs 的分解代谢第16-17页
   ·SGAs 的遗传操作第17-18页
   ·研究前景第18页
   ·本研究的目的、意义及技术路线第18-21页
     ·研究意义第18-19页
     ·研究目标第19-20页
     ·研究的技术路线第20-21页
第二章 SGAs 相关酶基因表达特点的研究第21-32页
   ·实验材料第21页
   ·实验方法第21-24页
     ·组织培养和微型薯的获得第21页
     ·光处理第21页
     ·总 RNA 提取及其纯度及浓度的检测第21-22页
     ·反转录第22-23页
     ·引物设计第23页
     ·实时定量 PCR第23-24页
     ·数据分析第24页
   ·结果分析第24-30页
     ·微型薯的获得第24页
     ·总 RNA 的提取结果第24-25页
     ·产物特异性检测第25-26页
     ·不同马铃薯品种中 SGA 相关酶的表达特点第26-28页
     ·红光诱导基因的表达第28页
     ·不同时间对 SGAs 相关基因表达量的影响第28-30页
   ·讨论第30-32页
第三章 SGT3 基因启动子表达载体的构建第32-43页
   ·植物材料、菌种和质粒第32页
   ·试验方法第32-37页
     ·马铃薯 sgt3 基因启动子的克隆和序列分析第32-33页
     ·引物设计第33页
     ·各缺失片段的获得第33-34页
     ·T 中间载体的连接第34-35页
     ·大肠杆菌转化和蓝白斑筛选第35页
     ·T 中间载体的鉴定第35-36页
     ·表达载体构建及重组子鉴定第36-37页
     ·农杆菌感受态细胞的制备及冻融法转化第37页
   ·结果分析第37-42页
     ·sgt3 启动子的序列分析第37-39页
     ·不同长度 sgt3 启动子的扩增第39-41页
     ·不同长度 sgt3 的 T 载体重组子的鉴定第41页
     ·不同长度 sgt3 的表达载体重组子的鉴定第41-42页
   ·讨论第42-43页
第四章 sgt3 基因启动子在烟草中的遗传转化第43-48页
   ·植物材料第43页
   ·试验方法第43-44页
     ·烟草遗传转化第43页
     ·sgt3 基因的瞬时表达第43页
     ·sgt3 基因组织特异性分析第43-44页
     ·GUS 组织化学染色第44页
   ·结果分析第44-46页
     ·转基因烟草植株的获得及 Kan 抗性培养基上的生根筛选第44-45页
     ·不同长度的 sgt3 驱动 gus 基因在烟草中的表达第45-46页
     ·不同组织中 sgt3 驱动 GUS 基因的特异性表达第46页
   ·讨论第46-48页
第五章 结论第48-49页
参考文献第49-54页
致谢第54-55页
作者简历第55-56页
导师简介第56-57页

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