| 摘要 | 第1-16页 |
| Abstract | 第16-23页 |
| 第一部分 榄香烯对乏氧 A549 和 H520 细胞的放射增敏作用及对mTOR、HIF-1α和 Survivin 表达的影响 | 第23-46页 |
| (一) 前言 | 第23页 |
| (二) 材料和方法 | 第23-31页 |
| 0. 主要药品与试剂 | 第23-24页 |
| 1. 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2. 方法 | 第25-31页 |
| ·细胞培养 | 第25页 |
| ·细胞照射方法和乏氧方法 | 第25-26页 |
| ·MTT 实验检测榄香烯作用乏氧 A549 和 H520 细胞的IC50 值 | 第26页 |
| ·克隆形成实验观察榄香烯对 A549 和 H520 细胞的放射增敏作用 | 第26页 |
| ·RT-PCR 方法检测 mTOR、HIF-1α和 Survivin mRNA表达 | 第26-29页 |
| ·WesternBolt 方法检测 mTOR、HIF-1α和 Survivin 蛋白表达 | 第29-30页 |
| ·流式细胞仪检测凋亡 | 第30-31页 |
| ·统计学处理 | 第31页 |
| (三) 结果 | 第31-39页 |
| 1. 榄香烯对不同乏氧肺癌细胞株的直接杀伤作用比较 | 第31页 |
| 2. 克隆形成实验结果 | 第31-33页 |
| 3. A549 和 H520 细胞中 mTOR mRNA 和蛋白表达 | 第33-34页 |
| 4. A549 和 H520 细胞中 HIF-1α mRNA 和蛋白表达 | 第34-36页 |
| 5. A549 和 H520 细胞中 Survivin mRNA 和蛋白表达 | 第36-38页 |
| 6. 肺癌细胞凋亡情况 | 第38-39页 |
| (四) 讨论 | 第39-42页 |
| (五) 结论 | 第42-43页 |
| (六) 参考文献 | 第43-46页 |
| 第二部分 mTOR 和 HIF-1α/Survivin 信号通路对乏氧 A549 和 H520细胞增殖、侵袭和迁移活性的影响 | 第46-66页 |
| (一) 前言 | 第46页 |
| (二) 材料和方法 | 第46-51页 |
| 0. 主要药品与试剂 | 第46-47页 |
| 1. 主要仪器 | 第47-48页 |
| 2. 方法 | 第48-51页 |
| ·细胞培养 | 第48页 |
| ·细胞分组与处理方法 | 第48页 |
| ·细胞转染 | 第48-49页 |
| ·RT-PCR 检测 mTOR、HIF-1α和 Survivin mRNA 表达 | 第49页 |
| ·WesternBlot 检测 HIF-1α和 Survivin 的蛋白表达 | 第49-50页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第50页 |
| ·MTT 法检测 A549 和 H520 细胞的活性 | 第50页 |
| ·转染后 A549 和 H520 细胞侵袭和迁移能力的体外研究 | 第50页 |
| ·统计学处理 | 第50-51页 |
| (三) 结果 | 第51-58页 |
| 1. A549 和 H520 细胞基因沉默效果 | 第51-52页 |
| 2. mTOR 表达抑制后乏氧肺癌细胞中 HIF-1α和 Survivin 的表达 | 第52-55页 |
| 3. HIF-1α表达抑制后乏氧肺癌细胞中 Survivin 的表达 | 第55-56页 |
| 4. mTOR 和 HIF-1α表达抑制后乏氧肺癌细胞的凋亡 | 第56-57页 |
| 5. mTO R 和 H I F - 1 α表达抑制后乏氧肺癌细胞的增殖活性 | 第57页 |
| 6. mTOR 和 HIF-1α表达抑制后乏氧肺癌细胞侵袭和迁移能力研究 | 第57-58页 |
| (四) 讨论 | 第58-62页 |
| (五) 结论 | 第62-63页 |
| (六) 参考文献 | 第63-66页 |
| 第三部分 榄香烯对乏氧 A549 和 H520 细胞的放射增敏作用与mTOR 和 HIF-1α/Survivin 信号通路的相关性研究 | 第66-82页 |
| (一) 前言 | 第66页 |
| (二) 材料和方法 | 第66-68页 |
| 0. 主要药品与试剂 | 第66-67页 |
| 1. 主要仪器 | 第67页 |
| 2. 方法 | 第67-68页 |
| ·细胞培养 | 第67页 |
| ·细胞分组与处理方法 | 第67-68页 |
| ·细胞转染 | 第68页 |
| ·RT-PCR 方法检测 mTOR、HIF-1α和 Survivin mRNA表达 | 第68页 |
| ·WesternBlot 方法检测 mTOR、HIF-1α和 Survivin 蛋白表达 | 第68页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第68页 |
| ·统计学处理 | 第68页 |
| (三) 结果 | 第68-76页 |
| 1. siRNA 转染后乏氧肺癌细胞中 mTOR 和 HIF-1α的沉默效果 | 第68-70页 |
| 2. mTOR 表达抑制后榄香烯和照射对乏氧肺癌细胞 HIF-1α、Survivin 表达的影响 | 第70-73页 |
| 3. mTOR 表达抑制后乏氧肺癌细胞凋亡情况 | 第73-74页 |
| 4. HIF-1α表达抑制后榄香烯和照射对乏氧肺癌细胞 Survivin表达的影响 | 第74-75页 |
| 5. HIF-1α表达抑制后乏氧肺癌细胞凋亡情况 | 第75-76页 |
| (四) 讨论 | 第76-79页 |
| (五) 结论 | 第79-80页 |
| (六) 参考文献 | 第80-82页 |
| 综述 | 第82-92页 |
| 参考文献 | 第88-92页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |