摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-15页 |
英文缩略词 | 第15-17页 |
前言 | 第17-21页 |
第一部分:载 OVA 抗原的 DCs 靶向免疫脂质体的制备及表征 | 第21-34页 |
1 仪器与材料 | 第22-23页 |
·仪器 | 第22-23页 |
·材料与试剂 | 第23页 |
·细胞与动物 | 第23页 |
2 实验方法 | 第23-27页 |
·载 OVA 抗原脂质体的制备及表征 | 第23-24页 |
·载 OVA 抗原脂质体的制备 | 第23-24页 |
·载 OVA 抗原脂质体的粒径和 Zeta 电位测定 | 第24页 |
·CD11c 单克隆抗体修饰的免疫脂质体的制备及表征 | 第24-27页 |
·免疫脂质体的制备及纯化 | 第24-25页 |
·免疫脂质体的粒径和 Zeta 电位测定 | 第25页 |
·别藻青蛋白标记的 CD11c 单克隆抗体浓度标准曲线 | 第25页 |
·免疫脂质体的抗体连接率测定 | 第25页 |
·FITC 荧光标记的 OVA 溶液标准曲线的绘制 | 第25页 |
·免疫脂质体包封率的测定 | 第25-26页 |
·免疫脂质体形态的透射电镜观察 | 第26页 |
·裸鼠离体皮肤的制备 | 第26页 |
·皮肤表面免疫脂质体染色后激光共聚焦观察 | 第26页 |
·小鼠骨髓来源的树突状细胞的培养 | 第26页 |
·免疫脂质体表面连接的单克隆抗体活性的测定 | 第26-27页 |
3 结果 | 第27-32页 |
·免疫脂质体的 Sepharose CL 4B 层析柱纯化 | 第27页 |
·制备的脂质体及免疫脂质体的外观、粒径及 Zeta 电位 | 第27-29页 |
·APC 标记的 CD11c 单抗标准曲线的绘制及脂质体连接率测定 | 第29页 |
·FITC OVA 溶液标准曲线的绘制和免疫脂质体包封率的测定 | 第29-32页 |
4 讨论 | 第32-33页 |
5 小结 | 第33-34页 |
第二部分:基于微针给药的免疫脂质体经皮促透效果及递送机理研究 | 第34-50页 |
1 仪器与材料 | 第35-36页 |
·仪器 | 第35-36页 |
·材料与试剂 | 第36页 |
·细胞与动物 | 第36页 |
2 实验方法 | 第36-40页 |
·离体皮肤的制备及预处理 | 第36页 |
·微针穿刺实验方法 | 第36页 |
·微针处理对免疫脂质体包载抗原的经皮促透作用 | 第36-37页 |
·微针处理后透皮实验中皮肤内 OVA 抗原含量的测定 | 第37页 |
·微针处理对免疫脂质体的皮内促透效果的激光共聚焦显微镜观察 | 第37-38页 |
·微针对离体皮肤穿刺效果的形态观察 | 第38页 |
·台盼蓝染色实验 | 第38页 |
·免疫组化染色实验 | 第38页 |
·微针处理后皮肤表面的扫描电镜观察 | 第38页 |
·微针处理对皮肤透过功能的影响:经皮水份流失(TEWL)值的测定 | 第38-39页 |
·在体裸鼠和人体皮肤微针穿刺后 TEWL 值的测定 | 第38-39页 |
·离体裸鼠皮肤微针穿刺后 TEWL 值的测定 | 第39页 |
·微针穿刺对皮肤刺激反应评价 | 第39-40页 |
3 结果 | 第40-47页 |
·微针阵列及进针装置 | 第40页 |
·微针阵列处理对免疫脂质体包载 OVA 抗原的经皮促透作用 | 第40-42页 |
·微针处理经皮促透作用的激光共聚焦显微镜观察 | 第42-43页 |
·微针对离体皮肤穿刺效果的形态观察 | 第43-46页 |
·微针对裸鼠离体皮肤穿刺效果的台盼蓝染色实验观察 | 第43-44页 |
·微针对离体皮肤穿刺效果的免疫组化染色观察 | 第44-45页 |
·微针对离体皮肤穿刺效果的扫描电镜观察 | 第45-46页 |
·微针穿刺后皮肤的透过功能评价 | 第46-47页 |
·微针穿刺的皮肤刺激反应评价 | 第47页 |
4 讨论 | 第47-48页 |
5 小结 | 第48-50页 |
第三部分:免疫脂质体对 DCs 的主动靶向作用及对其功能的影响研究 | 第50-63页 |
1 仪器与材料 | 第51-52页 |
·仪器 | 第51-52页 |
·材料与试剂 | 第52页 |
·细胞与动物 | 第52页 |
2 实验方法 | 第52-55页 |
·小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDCs)的培养 | 第52页 |
·小鼠耳部皮肤来源的树突状细胞(dDCs)的培养 | 第52-53页 |
·免疫脂质体体外 DCs 靶向效率测定 | 第53页 |
·免疫脂质体体外 DCs 靶向性的激光共聚焦显微镜观察 | 第53页 |
·免疫脂质体对 DCs 表面成熟相关分子表达的影响 | 第53页 |
·免疫脂质体刺激 DCs 分泌细胞因子 TNF α水平的检测 | 第53-54页 |
·DCs 抗原摄取功能实验 | 第54页 |
·DCs 对双荧光免疫脂质体摄取的动力学观察 | 第54页 |
·免疫脂质体微针透皮给药 | 第54页 |
·DCs 摄取透皮抗原后向淋巴结和脾脏迁移情况观察 | 第54-55页 |
3 结果 | 第55-60页 |
·免疫脂质体体外具有 DCs 特异靶向性 | 第55-56页 |
·免疫脂质体体外 DCs 靶向性的激光共聚焦显微镜观察 | 第56-57页 |
·免疫脂质体可促进 DCs 的表型成熟 | 第57-58页 |
·免疫脂质体可促进 DCs 分泌前炎性细胞因子 TNF α | 第58页 |
·免疫脂质体可促进 DCs 对免疫脂质体包载抗原的摄取 | 第58-59页 |
·DCs 可将摄取的抗原有效转运至引流淋巴结和脾脏 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-62页 |
5 小结 | 第62-63页 |
第四部分:载 OVA 免疫脂质体基于微针给药经皮免疫的体内效果评价 | 第63-77页 |
1 仪器与材料 | 第63-65页 |
·仪器 | 第63-64页 |
·材料与试剂 | 第64页 |
·细胞与动物 | 第64-65页 |
2 实验方法 | 第65-68页 |
·小鼠的免疫 | 第65-66页 |
·免疫小鼠血清中 OVA 特异性抗体滴度的测定 | 第66页 |
·小鼠荷瘤及观察 | 第66页 |
·免疫小鼠脾细胞的制备 | 第66-67页 |
·T 细胞增殖实验 | 第67页 |
·免疫小鼠脾细胞抗原再刺激分泌 IL 2、IFN γ水平的检测 | 第67页 |
·CTL 杀伤试验 | 第67-68页 |
3 结果 | 第68-75页 |
·免疫脂质体经皮免疫对 E.G7 OVA 肿瘤生长的抑制作用 | 第68-69页 |
·免疫脂质体经皮免疫延长了荷瘤小鼠的生存期 | 第69-70页 |
·免疫脂质体经皮免疫产生了有效的体液免疫应答 | 第70-71页 |
·免疫脂质体经皮免疫产生了 OVA 抗原特异性的 T 细胞增殖 | 第71-72页 |
·免疫脂质体经皮免疫产生的免疫应答是 Th1 偏向的 | 第72-74页 |
·免疫脂质体经皮免疫诱导小鼠产生了抗原特异性 CTL | 第74-75页 |
4 讨论 | 第75页 |
5 小结 | 第75-77页 |
全文总结 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-84页 |
综述 | 第84-106页 |
参考文献 | 第99-106页 |
发表论文及参加的科研工作 | 第106-107页 |
致谢 | 第107页 |