| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-30页 |
| ·缺氧缺血再灌注脑损伤 | 第17-23页 |
| ·兴奋性氨基酸及其毒性 | 第18页 |
| ·氧自由基损伤作用 | 第18-20页 |
| ·钙离子平衡紊乱 | 第20页 |
| ·一氧化氮的毒性作用 | 第20-21页 |
| ·体液因子 | 第21-23页 |
| ·中枢神经细胞凋亡与HIE | 第23-25页 |
| ·c-fos原癌基因 | 第25-26页 |
| ·c-fos原癌基因的表达与细胞凋亡 | 第26-27页 |
| ·斑马鱼缺氧再灌注脑损伤模型 | 第27-29页 |
| ·本论文的工作目的和内容 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-43页 |
| ·斑马鱼(Danio rerio)AB品系 | 第30页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第30-31页 |
| ·主要试剂配制 | 第31-33页 |
| ·方法 | 第33-43页 |
| ·缺氧处理 | 第33-34页 |
| ·吖啶橙(acridine orange,AO)染色 | 第34页 |
| ·取脑 | 第34-35页 |
| ·采用TRIzol试剂提取脑组织中的总RNA | 第35页 |
| ·RNA浓度的检测 | 第35页 |
| ·逆转录合成cDNA | 第35-36页 |
| ·RT-PCR扩增制备原位杂交探针的cDNA片段 | 第36页 |
| ·目的片段与pBluescript SK载体的连接 | 第36-37页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第37页 |
| ·细菌转化 | 第37-38页 |
| ·阳性克隆筛选及细菌培养 | 第38页 |
| ·质粒小量制备提取(OMEGA小规模质粒提取试剂盒) | 第38-39页 |
| ·质粒酶切线性化用于后续实验制备原位杂交探针 | 第39页 |
| ·用MicroElute Cycle-Pure试剂盒纯化酶切后的DNA | 第39页 |
| ·斑马鱼胚胎原位杂交实验 | 第39-43页 |
| 第三章 结果 | 第43-47页 |
| ·缺氧对斑马鱼胚胎脑部细胞凋亡的影响 | 第43-45页 |
| ·缺氧再灌注后对斑马鱼整体c-fos基因探针表达的结果 | 第45页 |
| ·缺氧对斑马鱼脑组织c-fos基因表达的影响 | 第45-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 攻读学位期间成果 | 第60-61页 |
| 附录 (缩写词中英文对照) | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
