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重组人凝血因子Ⅷ(rhFⅧ)表达载体构建及在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中高效表达

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
中英文缩略词表第8-10页
第1章 引言第10-13页
第2章 材料与方法第13-38页
   ·主要材料及试剂第13-14页
   ·仪器设备和产地第14-38页
     ·基因重组技术简易流程图第16-17页
     ·FⅧ PCR 片段 1 与线性 T 载体的 TA 克隆第17-25页
     ·质粒 pTriEx-4-FⅧ 的构建第25-27页
     ·质粒 pBluscript II KS-IRES-DHFR 的构建第27-30页
     ·质粒 pTriEx-4-FⅧ-IRES-DHFR 的构建第30-32页
     ·CHO-dhfr—细胞的培养第32-34页
     ·质粒 pXLG-EGFP 转染 CHO-dhfr—细胞第34-36页
     ·重组质粒 pTriEx-4-FⅧ-IRES-DHFR 转染 CHO-dhfr—细胞第36-37页
     ·rhFⅧ 抗原含量检测第37-38页
第3章 实验结果第38-46页
   ·TA 克隆质粒 pEASY-T5 Zero/ Nco I-FⅧf1-Kpn I 的鉴定第38-39页
     ·pEASY-T5 Zero/ Nco I-FⅧf1-Kpn I 经 Not I,Nco I 双酶切第38页
     ·pEASY-T5 Zero/ Nco I-FⅧf1-Kpn I 经 Nco I 单切第38-39页
     ·pEASY-T5 Zero/ Nco I-FⅧf1-Kpn I 测序鉴定第39页
   ·TA 克隆质粒 pEasy-T5-Zero-FⅧ 的酶切鉴定第39-40页
   ·重组质粒 pTriEx-4-FⅧ 的及酶切鉴定第40-41页
   ·重组质粒 pBluscript II KS-IRES-EGFP 的酶切鉴定第41页
   ·重组质粒 pBluscript II KS-IRES-DHFR 的酶切鉴定第41-42页
   ·重组质粒 pTriEx-4-FⅧ-IRES-DHFR 的酶切鉴定第42-43页
   ·pXLG-EGFP 在 CHO-dhfr—细胞中的表达第43-44页
   ·rhFⅧ 抗原表达量检测结果(ELISA 法)第44-46页
第4章 讨论第46-48页
第5章 结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-52页
攻读学位期间的研究成果第52-53页
综述第53-58页
 参考文献第57-58页

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