| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-26页 |
| 综述一 牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的研究进展 | 第15-21页 |
| 1 BVDV概述 | 第15-16页 |
| ·BVDV病毒特性 | 第15-16页 |
| ·病毒的生物型 | 第16页 |
| 2 病毒基因组及其编码蛋白 | 第16-18页 |
| ·病毒基因组 | 第16页 |
| ·编码结构蛋白 | 第16-17页 |
| ·编码的非结构蛋白 | 第17-18页 |
| 3 BVDV感染抑制宿主的免疫反应 | 第18-21页 |
| ·BVDV感染抑制宿主适应性免疫 | 第18-19页 |
| ·BVDV感染抑制宿主固有免疫 | 第19-21页 |
| 综述二 纳米抗体的研究进展 | 第21-26页 |
| 1 纳米抗体的概述 | 第21-23页 |
| ·纳米抗体的发现 | 第21-22页 |
| ·纳米抗体的结构及功能 | 第22页 |
| ·纳米抗体的特性 | 第22-23页 |
| 2 纳米抗体在抗感染中的应用 | 第23-26页 |
| ·VHH抗细菌的应用 | 第23-24页 |
| ·纳米抗体用于抵抗真菌生物和寄生虫 | 第24页 |
| ·VHH靶向病毒 | 第24-26页 |
| 第二章 试验研究 | 第26-54页 |
| 实验一 牛病毒性腹泻病毒E~(RNS)、E2蛋白的表达纯化 | 第26-39页 |
| 摘要 | 第26页 |
| 1 材料与方法 | 第26-32页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-32页 |
| 2 结果 | 第32-37页 |
| ·目的基因的扩增 | 第32-33页 |
| ·重组质粒PMD19-T-E~(RNS)/E2的鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·原核产物的表达 | 第35-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| ·牛病毒性腹泻病毒囊膜蛋白E2、E~(RNS)的研究 | 第37-38页 |
| ·原核表达载体的构建及蛋白的诱导表达 | 第38页 |
| ·包涵体纯化应注意的问题 | 第38页 |
| 4 小结 | 第38-39页 |
| 实验二 噬菌体展示ANTI-BVDV纳米抗体文库的构建 | 第39-54页 |
| 摘要 | 第39-40页 |
| 1 材料和方法 | 第40-47页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-47页 |
| 2 结果 | 第47-52页 |
| ·病毒增殖 | 第47-48页 |
| ·常规微量法测定BVDV-NADL株TCID50 | 第48页 |
| ·全病毒抗原的灭活检测 | 第48页 |
| ·免疫后抗体效价的测定 | 第48-49页 |
| ·总RNA的提取与分析 | 第49页 |
| ·纳米抗体基因（VHH）的扩增 | 第49-50页 |
| ·重组质粒PCANTAB5E-VHH酶切鉴定 | 第50-51页 |
| ·初始文库的抗体序列多样性和库容量测定 | 第51-52页 |
| ·噬菌体抗体库的库容量测定 | 第52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| ·驼源单域抗体基因序列的扩增 | 第52-53页 |
| ·噬菌体抗体库的构建 | 第53页 |
| 4 小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54页 |
| 创新点 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录：主要试剂的配制 | 第63-67页 |
| 一、分子克隆所需试剂的配制 | 第63页 |
| 二、蛋白表达与纯化所需试剂的配制 | 第63-64页 |
| 三、细胞培养所需试剂的配制 | 第64-65页 |
| 四、试剂盒操作说明书 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68-69页 |
| 导师评阅表 | 第69页 |
