| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 縮略语表（ABBREVIATION) | 第11-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-20页 |
| ·天然免疫简介 | 第13-15页 |
| ·泛素化修饰的研究进展 | 第15-18页 |
| ·泛素化途径在干扰素信号通路中的作用 | 第18-20页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 第3章 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·实验材料 | 第21-25页 |
| ·毒株与菌株 | 第21页 |
| ·细胞以及转染相关材料 | 第21页 |
| ·载体构建所需材料及获赠载体 | 第21-23页 |
| ·Western Blot以及免疫共沉淀实验所需的材料 | 第23页 |
| ·培养基及其配制 | 第23-24页 |
| ·主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第25-26页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第26页 |
| ·PCR产物或酶切产物的电泳检测 | 第26页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第26-27页 |
| ·连接产物的转化 | 第27页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第27页 |
| ·人的USP25及其突变体的表达质粒的构建 | 第27-28页 |
| ·荧光素酶报告基因实验 | 第28页 |
| ·USP25干扰分子的合成 | 第28-29页 |
| ·实时定量RT-PCR检测基因mRNA水平 | 第29页 |
| ·Westenr Blot 样品制备 | 第29页 |
| ·体外去泛素化实验 | 第29-30页 |
| ·免疫共沉淀技术检测蛋白泛素化水平 | 第30页 |
| ·统计学方法 | 第30-31页 |
| 第4章 结果与分析 | 第31-46页 |
| ·USP25参与抗病毒天然免疫反应 | 第31-33页 |
| ·USP25调节SEV诱导的ISRE启动子活性 | 第31-32页 |
| ·USP25真核表达质粒的构建与鉴定 | 第32页 |
| ·USP25显著抑制多种细胞因子的转录 | 第32-33页 |
| ·USP25负调控Ⅰ型干扰素信号通路的分子机制 | 第33-37页 |
| ·USP25抑制SEV诱导的IFN-β转录 | 第34页 |
| ·干扰USP25激活SEV诱导的IFN-β转录 | 第34-35页 |
| ·USP25通过抑制IRF-3和NF-κB的激活抑制IFN-β产生 | 第35-36页 |
| ·USP25抑制IRF3以及p65的磷酸化 | 第36-37页 |
| ·USP25具有去泛素化活性且参与其抑制干扰素信号通路 | 第37-46页 |
| ·USP25在体外能切割K48和K63连接的多聚泛素链 | 第37-38页 |
| ·USP25在体内去泛素化活性检测 | 第38-39页 |
| ·USP25去泛素化活性位点鉴定 | 第39-41页 |
| ·USP25的去泛素化活性参与其抑制干扰素信号通路 | 第41-42页 |
| ·USP25负调控RIG-I等干扰素调节蛋白激活的干扰素表达 | 第42-43页 |
| ·USP25去除干扰素调节蛋白RIG-I、TRAF2以及TRAF6的泛素化 | 第43-44页 |
| ·USP25与RIG-I以及TRAF6存在相互作用 | 第44-46页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第46-49页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录 | 第55-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
