| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·黄花蒿的概况 | 第11页 |
| ·青蒿素与疟疾 | 第11-14页 |
| ·青蒿素理化性质 | 第12-13页 |
| ·青蒿素药理作用机理 | 第13页 |
| ·青蒿素衍生物 | 第13-14页 |
| ·疟疾 | 第14页 |
| ·青蒿素生物合成途径 | 第14-21页 |
| ·青蒿素生物合成场所 | 第14-16页 |
| ·青蒿素生物合成上游途径 | 第16-18页 |
| ·青蒿素生物合成下游途径 | 第18-21页 |
| 第二章 绪论 | 第21-23页 |
| ·研究目的与意义 | 第21页 |
| ·研究的内容和范围 | 第21-22页 |
| ·本研究的技术路线 | 第22-23页 |
| 第三章 pCAMBIA1304~+-ads-hdr高效植物表达载体的构建 | 第23-31页 |
| ·实验材料及试剂 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·仪器设备 | 第23页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第23-24页 |
| ·常规实验操作方法和步骤 | 第24-28页 |
| ·总RNA的提取与检测 | 第24-25页 |
| ·目的条带的回收 | 第25页 |
| ·连接反应 | 第25页 |
| ·CaCl_2法制备大肠杆菌DH5a感受态细胞 | 第25-26页 |
| ·连接产物或重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第26页 |
| ·质粒的提取 | 第26页 |
| ·重组子的鉴定、测序 | 第26-27页 |
| ·农杆菌LBA4404感受态的制备(CaCl_2法) | 第27页 |
| ·重组质粒转化农杆菌感受态细胞 | 第27页 |
| ·RNA反转录成cDNA | 第27-28页 |
| ·pCAMBIA1304~+-ads-hdr植物高效表达载体构建及工程菌的获得 | 第28-31页 |
| ·植物总RNA提取 | 第28页 |
| ·引物设计 | 第28-29页 |
| ·pCAMBIA1304~+构建 | 第29-30页 |
| ·pCAMBIA130~4+-ads-hdr载体构建 | 第30页 |
| ·LBA4404-pCAMBIA1304~+-ads-hdr工程菌的获得 | 第30-31页 |
| 第四章 转基因黄花蒿的获得及分析 | 第31-47页 |
| ·实验材料和常规方法步骤 | 第31-32页 |
| ·实验材料及仪器设备 | 第31页 |
| ·常规方法及步骤 | 第31-32页 |
| ·工程菌遗传转化黄花蒿 | 第32-33页 |
| ·黄花蒿无菌苗的获得 | 第32页 |
| ·工程菌活化 | 第32页 |
| ·叶盘法遗传转化黄花蒿 | 第32-33页 |
| ·暗培养 | 第33页 |
| ·抗性筛选培养 | 第33页 |
| ·生根培养 | 第33页 |
| ·黄花蒿炼苗 | 第33页 |
| ·黄花蒿田间试验 | 第33页 |
| ·转基因黄花蒿鉴定 | 第33-34页 |
| ·青蒿素含量测定 | 第34-35页 |
| ·青蒿素提取 | 第34-35页 |
| ·HPLC-ELSD测定青蒿素含量 | 第35页 |
| ·目的基因ads和hdr的表达量检测 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-47页 |
| ·转基因黄花蒿的检测 | 第36-38页 |
| ·转基因黄花蒿的组织培养和田间试验结果 | 第38-40页 |
| ·转ads和hdr基因黄花蒿青蒿素含量分析 | 第40-41页 |
| ·转基因植株ads和hdr基因表达量分析 | 第41-47页 |
| 第五章 结论与展望 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录 | 第55-59页 |
| 附录A：实验室常用培养基和抗生素配置 | 第55-56页 |
| 附录B：发表论文情况 | 第56-57页 |
| 附录C：缩略词 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
