| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| Catalogue | 第12-16页 |
| 第一章 综述 | 第16-28页 |
| 1 植物耐盐性研究现状 | 第16-19页 |
| ·植物耐盐性研究的模式生物 | 第16页 |
| ·植物盐胁迫诱导信号转导途径研究 | 第16-18页 |
| ·MAPK 级联反应途径（Ca~(2+)非依赖型） | 第17页 |
| ·Ca~(2+)依赖型信号转导通路 | 第17-18页 |
| ·耐盐作物研究 | 第18-19页 |
| 2 盐藻的研究 | 第19-21页 |
| ·盐藻的生理特征及耐盐机理的研究 | 第19-20页 |
| ·盐藻基因工程的研究 | 第20-21页 |
| ·盐藻基因的研究 | 第20-21页 |
| ·盐藻生物反应器的研究 | 第21页 |
| 3 MAPK 研究进展 | 第21-26页 |
| ·MAPK 蛋白结构 | 第21-22页 |
| ·植物中 MAPK 的分类 | 第22-23页 |
| ·MAPK 的功能和研究方法 | 第23-24页 |
| ·MAPK 的信号途径 | 第24-25页 |
| ·MAPK 的亚细胞定位 | 第25页 |
| ·MAPK 在盐藻中的研究进展 | 第25-26页 |
| 4 研究目的和意义 | 第26页 |
| 5 研究内容和技术路线 | 第26-28页 |
| 第二章 DsMAPK 基因全长 cDNA 的克隆 | 第28-48页 |
| 1 实验材料 | 第28-31页 |
| ·藻种、菌株和质粒 | 第28-29页 |
| ·实验试剂 | 第29页 |
| ·药品的配制 | 第29页 |
| ·实验仪器 | 第29-30页 |
| ·引物 | 第30-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-42页 |
| ·盐藻总 RNA 的制备 | 第31-32页 |
| ·盐藻的培养 | 第31页 |
| ·盐藻 RNA 的提取 | 第31-32页 |
| ·总 RNA 的质量与含量检测 | 第32页 |
| ·吸光度测定法 | 第32页 |
| ·凝胶电泳测定方法 | 第32页 |
| ·DsMAPK 基因 cDNA 中间片段的克隆 | 第32-37页 |
| ·盐藻总 RNA 的反转录（RT） | 第32-33页 |
| ·简并引物的设计 | 第33页 |
| ·盐藻促有丝分裂活化蛋白激酶 MAPK 中间片段扩增 | 第33-34页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第34-35页 |
| ·感受态细胞的制备、连接和转化 | 第35页 |
| ·质粒鉴定 | 第35-37页 |
| ·3 ′，5′cDNA 末端快速扩增（3′，5′RACE） | 第37-41页 |
| ·DsMAPK 基因 cDNA3′端序列的克隆 | 第37-39页 |
| ·DsMAPK 基因 cDNA5′端序列的克隆 | 第39-41页 |
| ·DsMAPK 基因 ORF 的克隆 | 第41-42页 |
| 3 实验结果 | 第42-46页 |
| ·总RNA的质量与含量 | 第42-43页 |
| ·DsMAPK基因cDNA中间片段的克隆与序列分析 | 第43页 |
| ·DsMAPK 基因全长 cDNA 的克隆与序列分析 | 第43-46页 |
| ·3′RACE产物的克隆与序列分析 | 第43-44页 |
| ·5′RACE产物的克隆与序列分析 | 第44-45页 |
| ·DsMAPK基因全长的拼接和开放阅读框的扩增 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 DsMAPK 基因的生物信息学分析 | 第48-59页 |
| 1 实验方法 | 第48-49页 |
| 2 实验结果 | 第49-57页 |
| ·DsMAPK 的基本理化性质分析 | 第49-51页 |
| ·蛋白质的亚细胞定位 | 第51页 |
| ·蛋白的跨膜区分析 | 第51页 |
| ·蛋白的信号肽预测 | 第51-52页 |
| ·蛋白质的保守结构域和功能位点预测 | 第52-53页 |
| ·蛋白质的磷酸化位点预测 | 第53-54页 |
| ·蛋白质的二、三级结构分析 | 第54-55页 |
| ·促有丝分裂活化蛋白激酶 MAPK 蛋白同源性分析 | 第55页 |
| ·构建促有丝分裂活化蛋白激酶 MAPK 系统进化树 | 第55-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 盐胁迫条件下 DsMAPK 基因的表达分析 | 第59-65页 |
| 1 实验材料 | 第59-60页 |
| ·藻种 | 第59页 |
| ·实验试剂 | 第59页 |
| ·药品的配制 | 第59页 |
| ·实验仪器 | 第59-60页 |
| 2 实验方法 | 第60-62页 |
| ·时间梯度的设定 | 第60页 |
| ·样品总 RNA 的提取 | 第60页 |
| ·cDNA 模板链的合成 | 第60-61页 |
| ·荧光定量 PCR | 第61-62页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第61页 |
| ·Real-Time PCR检测盐胁迫下DsMAPK的表达水平 | 第61-62页 |
| ·数据统计与分析 | 第62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-64页 |
| ·提取的 RNA | 第62-63页 |
| ·标准曲线的制作 | 第63页 |
| ·Real-time PCR 结果 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-65页 |
| 第五章 DsMAPK 基因真核表达载体的构建 | 第65-77页 |
| 1 实验材料 | 第65-66页 |
| ·藻种、菌株和质粒 | 第65页 |
| ·实验试剂 | 第65页 |
| ·药品的配制 | 第65页 |
| ·实验仪器 | 第65-66页 |
| 2 实验方法 | 第66-72页 |
| ·PCR 扩增与表达载体的构建 | 第68-72页 |
| ·pMDCKGN-Cat 的获得 | 第68-71页 |
| ·pMDCMGN-Cat 的获得 | 第71-72页 |
| ·盐藻细胞的转化及瞬时表达 | 第72页 |
| 3 实验结果 | 第72-75页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第72-74页 |
| ·真核表达载体pMDCKGN-Cat的构建 | 第72-74页 |
| ·真核表达载体pMDCMGN-Cat的构建 | 第74页 |
| ·蛋白表达 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-77页 |
| 结论与展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-85页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第85-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 附录 1 | 第89-91页 |
| 附录 2 | 第91-92页 |
