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铜绿假单胞菌致病因子抑制剂及喹诺酮信号分子介导的调节途径研究

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
目录第9-15页
第一章 绪论第15-35页
   ·铜绿假单胞菌第15-33页
     ·铜绿假单胞菌的致病机理第15-17页
     ·铜绿假单胞茵Ⅲ型分泌系统第17-22页
     ·铜绿假单胞菌生物被膜第22-24页
     ·铜绿假单胞菌运动性第24-26页
     ·铜绿假单胞菌的耐药机制第26-29页
     ·铜绿假单胞菌群体感应系统及致病性第29-31页
     ·铜绿假单胞菌喹诺酮类信号分子第31-33页
   ·抗感染中药第33-34页
   ·研究目的和意义第34-35页
第二章 实验材料和方法第35-50页
   ·实验材料第35-39页
     ·菌株及质粒第35-37页
     ·实验动物第37页
     ·培养基及培养条件第37-38页
     ·实验试剂及配置第38-39页
     ·实验仪器第39页
   ·实验方法第39-50页
     ·中药粗提物的制备第39-40页
     ·层培养基扩散法及半固体混药法检测基因表达第40-41页
     ·基因表达液体检测法(酶标检测仪)第41-42页
     ·细菌运动性检测第42页
     ·生物被膜(biofilm)的测定第42-43页
     ·弹性蛋白酶检测第43页
     ·浓硫酸-地衣酚法测定鼠李糖脂含量及活性第43-44页
     ·细胞毒性检测第44页
     ·果蝇感染模型第44-45页
     ·铜绿假单胞菌藻酸盐包埋颗粒的制备第45-46页
     ·大鼠肺部感染操作步骤第46页
     ·感染大鼠给药分组第46页
     ·肉眼观测大鼠肺部感染分级第46-47页
     ·大鼠肺病理切片制作第47页
     ·大鼠血清样本的采集和制备(ELISA法检测大鼠血清中TNF-α浓度)第47页
     ·大鼠肺组织中活菌计数第47-48页
     ·双亲株杂交将启动子.报道子序列整合于染色体第48页
     ·PQS提取及薄层层析检测第48-49页
     ·薄层层析所分离物质的刮板及浓缩第49页
     ·高效液相(HPLC)分析第49页
     ·质谱分析第49-50页
第三章 实验结果第50-86页
   ·20 种中药粗提物对铜绿假单胞菌毒性因子表达的影响第50-52页
     ·中药粗提库的构建第50页
     ·中药对铜绿假单胞菌毒性因子表达的影响第50-52页
   ·艾叶对铜绿假单胞菌毒性因子表达的影响第52-54页
     ·艾叶水提物抑制铜绿假单胞菌毒性因子的表达第52-53页
     ·艾叶水提物抑制铜绿假单胞菌的丛动能力第53-54页
   ·黄芩粗提物对铜绿假单胞菌毒性因子表达的影响第54-57页
     ·黄芩粗提物对铜绿假单胞菌毒性因子表达的影响第54-56页
     ·黄芩粗提物抑制铜绿假单胞菌丛动能力第56-57页
   ·黄芩有效成分黄芩苷对铜绿假单胞致病性的抑制第57-69页
     ·黄芩苷对铜绿假单胞菌毒性因子表达的影响第57-60页
     ·黄芩苷明显抑制细菌铜绿假单胞菌丛动能力第60页
     ·黄芩苷抑制弹性蛋白酶以及鼠李糖脂的合成第60-62页
     ·黄芩苷削弱铜绿假单胞菌对真核细胞的细胞毒性第62-63页
     ·果蝇感染模型中黄芩苷对铜绿假单胞菌致病性的抑制第63-64页
     ·大鼠肺部感染模型中黄芩苷对铜绿假单胞菌致病性的抑制第64-69页
   ·黄芩苷抑制铜绿假单胞菌致病性的作用机制研究第69-78页
     ·GacA途径与黄芩苷的作用第69-70页
     ·Rh1R/I-C4-HSL系统与黄芩苷的作用第70页
     ·黄芩苷以PQS系统为靶点来抑制Ⅲ型分泌系统的表达第70-75页
     ·黄芩苷对铜绿假单胞菌丛动能力的抑制作用与调控蛋白PqsR无关第75-76页
     ·黄芩苷对PQS系统信号分子产生的影响第76-77页
     ·未知物质的提取分离及鉴定第77-78页
   ·铜绿假单胞菌PQS群体感应调节系统对致病因子调节途径的研究第78-86页
     ·PQS可抑制细菌丛动能力,此抑制作用不依赖于调控蛋白PqsR的存在第78-80页
     ·PAO1蹭行运动需要调控蛋白PqsR的存在;PQS信号分子及调控蛋白PqsR对PAO1的泳动能力没有影响第80页
     ·外加PQS对影响铜绿假单胞菌运动相关基因的影响第80-82页
     ·PQS对铜绿假单胞菌生物被膜的促进作用不依赖于Las和Rhl系统第82-83页
     ·PQS对铜绿假单胞菌生物被膜的促进作用依赖于RetS/GacAS/Rsm系统第83-86页
第四章 讨论第86-94页
   ·中药中抗致病性成分的筛选第86页
   ·黄芩苷抗致病因子的作用机制研究第86-88页
   ·黄芩苷抑制铜绿假单胞菌丛动能力的研究第88-89页
   ·PQS信号分子及调控蛋白PqsR对铜绿假单胞菌运动性的影响第89-90页
   ·铜绿假单胞菌信号分子PQS促进生物被膜形成的机制研究第90-92页
   ·小结第92-94页
参考文献第94-107页
攻读博士学位期间取得的研究成果第107-108页
致谢第108-109页
作者简介第109页

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