基于CHS、ALS及LAR基因表达量差异解析大黄功效组分型形成的分子机制
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩略语 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-18页 |
| ·有关功效组分差异导致功效差异的报道 | 第12页 |
| ·有关大黄功效组分研究的报道 | 第12页 |
| ·植物基因同源克隆技术的研究进展 | 第12-13页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的研究进展 | 第13-15页 |
| ·原理 | 第13-14页 |
| ·检测模式 | 第14页 |
| ·定量方法 | 第14-15页 |
| ·应用 | 第15页 |
| ·大黄次生代谢途径研究进展 | 第15-18页 |
| ·蒽醌生物合成途径 | 第15-16页 |
| ·类黄酮生物合成途径 | 第16-18页 |
| 2 前言 | 第18-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-42页 |
| ·同一产区栽培大黄功效组分的含量测定 | 第20-29页 |
| ·样品采集与处理 | 第20-26页 |
| ·仪器与试剂 | 第26-27页 |
| ·色谱条件 | 第27页 |
| ·对照品溶液的制备 | 第27页 |
| ·供试品溶液的制备 | 第27页 |
| ·方法学考察 | 第27-28页 |
| ·样品测定 | 第28页 |
| ·数据处理与分析 | 第28-29页 |
| ·样品筛选 | 第29页 |
| ·大黄中关键功能基因核心片段的获取 | 第29-38页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·仪器与试剂 | 第29-30页 |
| ·查尔酮合酶基因核心片段的获取 | 第30-34页 |
| ·芦荟松合酶基因核心片段的获取 | 第34-35页 |
| ·无色花青素还原酶基因核心片段的获取 | 第35-37页 |
| ·内参基因(β-actin)核心片段的获取 | 第37-38页 |
| ·唐古特大黄功能基因表达量分析 | 第38-42页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·仪器与试剂 | 第39页 |
| ·唐古特大黄总RNA提取及cDNA第一链的合成 | 第39页 |
| ·引物设计与合成 | 第39-40页 |
| ·质粒标准品的构建 | 第40-41页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第41页 |
| ·数据处理与分析 | 第41-42页 |
| 4 结果 | 第42-81页 |
| ·HPLC定量分析 | 第42-62页 |
| ·色谱条件的确定 | 第42-44页 |
| ·方法学考察 | 第44-45页 |
| ·样品含量测定结果 | 第45-50页 |
| ·统计学分析 | 第50-57页 |
| ·样品筛选 | 第57-60页 |
| ·小结 | 第60-62页 |
| ·大黄中关键功能基因核心片段的获取 | 第62-67页 |
| ·总RNA的提取、纯化及逆转录合成单链cDNA | 第62页 |
| ·查尔酮合酶基因核心片段的获取 | 第62-63页 |
| ·芦荟松合酶基因核心片段的获取 | 第63-64页 |
| ·无色花青素还原酶基因核心片段的获取 | 第64-66页 |
| ·β-actin基因核心片段的获取 | 第66-67页 |
| ·小结 | 第67页 |
| ·功能基因表达量水平分析 | 第67-81页 |
| ·RNA提取、纯化及逆转录合成单链cDNA | 第67-68页 |
| ·重组质粒 | 第68-70页 |
| ·标准曲线 | 第70-71页 |
| ·溶解曲线 | 第71-72页 |
| ·数据分析 | 第72-80页 |
| ·小结 | 第80-81页 |
| 5 讨论 | 第81-85页 |
| ·实验结论 | 第81-83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| ·样品选取及误差处理 | 第83页 |
| ·大黄次生代谢途径中关键酶的选择 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 个人简历 | 第89页 |
