| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-21页 |
| ·猪伪狂犬病病毒 | 第10-13页 |
| ·猪伪狂犬病病毒分类及基因组结构 | 第10页 |
| ·猪伪狂犬病流行病学及临床症状 | 第10-11页 |
| ·猪伪狂犬病防治及疫苗研究 | 第11-13页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第13-15页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒分类及基因组结构 | 第13页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征流行病学及临床症状 | 第13-14页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征防治及疫苗研究 | 第14-15页 |
| ·杆状病毒表达系统 | 第15-19页 |
| ·杆状病毒表达载体的分子基础及系统组成 | 第15-16页 |
| ·杆状病毒表达系统的特点 | 第16-17页 |
| ·杆状病毒表达系统在疫苗研究中的应用 | 第17-19页 |
| ·本论文研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第21-36页 |
| ·材料 | 第21-26页 |
| ·菌株,细胞系和质粒 | 第21-22页 |
| ·引物 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23-24页 |
| ·主要缓冲液 | 第24-26页 |
| ·仪器和设备 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-36页 |
| ·琼脂糖凝胶回收目的DNA片段 | 第26-27页 |
| ·SDS碱裂解法制备质粒DNA | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第29-30页 |
| ·MAGIC克隆方法快速构建重组杆状病毒载体 | 第30-31页 |
| ·昆虫细胞Sf9的传代与培养 | 第31页 |
| ·昆虫细胞Sf9的冻存与复苏 | 第31-32页 |
| ·昆虫细胞Sf9的转染及杆状病毒粒子的收集与扩增 | 第32-33页 |
| ·目的蛋白在昆虫细胞Sf9中的表达 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE检测蛋白质的表达 | 第33-35页 |
| ·Western Blotting检测蛋白质的表达 | 第35-36页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第36-43页 |
| ·昆虫杆状病毒表达载体的构建 | 第36-41页 |
| ·供体质粒pMAGIC-HIS-gE和pMAGIC-HIS-N的构建 | 第36-38页 |
| ·利用接合转移(MAGIC)快速构建重组杆状病毒载体 | 第38-41页 |
| ·gE蛋白和N蛋白在昆虫细胞Sf9中的表达 | 第41-43页 |
| ·重组杆粒AcNPV bacmid-HIS-gE、AcNPV bacmid-HIS-N转染昆虫细胞Sf9 | 第41-42页 |
| ·Western blotting检测gE和N蛋白在昆虫细胞Sf9中的表达 | 第42-43页 |
| 第四部分 讨论与展望 | 第43-46页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·展望 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
