| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-20页 |
| ·生物防治技术的历史 | 第8页 |
| ·虫生真菌的应用前景 | 第8-9页 |
| ·虫生真菌基因工程的研究进展 | 第9页 |
| ·虫生真菌的致病机理 | 第9-13页 |
| ·体表附着阶段 | 第10页 |
| ·体壁穿透阶段 | 第10-12页 |
| ·体内定殖阶段 | 第12-13页 |
| ·几种与毒力有关的活性物质的研究现状 | 第13-16页 |
| ·Bt 毒力蛋白 | 第13-14页 |
| ·几丁质酶 | 第14-15页 |
| ·蝎毒 | 第15-16页 |
| ·几种虫生真菌的遗传转化方法 | 第16-18页 |
| ·电击转化法 | 第16-17页 |
| ·PEG/原生质体转化法 | 第17页 |
| ·芽生孢子转化方法 | 第17页 |
| ·农杆菌介导转化法 | 第17-18页 |
| ·基因枪转化法 | 第18页 |
| ·总结与展望 | 第18-20页 |
| 2 引言 | 第20-21页 |
| 3 材料与方法 | 第21-33页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·供试菌株 | 第21页 |
| ·供试质粒与基因 | 第21页 |
| ·药品与试剂 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·主要的仪器设备 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-33页 |
| ·技术流程 | 第22-23页 |
| ·pbarGPE1-pGEX/Cry1AC 中间载体的构建流程图 | 第23页 |
| ·pbarGPE1-pGEX/Cry1AC 转化虫生真菌试验流程图 | 第23-24页 |
| ·试验方法及步骤 | 第24-28页 |
| ·芽生孢子转化法 | 第28-29页 |
| ·球孢白僵菌基因组 DNA 的提取 | 第29-30页 |
| ·真菌转化子的 PCR 初步筛选与验证 | 第30页 |
| ·毒力的生物测定 | 第30-32页 |
| ·验证目的基因在菌株内的稳定性 | 第32-33页 |
| 4 结果与分析 | 第33-41页 |
| ·目的基因片段 pGEX/Cry1AC 的扩增结果 | 第33页 |
| ·pbarGPE1 和 pGEX/Cry1AC 酶切结果 | 第33-34页 |
| ·pbarGPE1-pGEX/Cry1AC 重组质粒的菌落 PCR 验证结果 | 第34页 |
| ·pbarGPE1-pGEX/Cry1AC 重组质粒的酶切验证 | 第34页 |
| ·球孢白僵菌转化子的测序验证 | 第34-35页 |
| ·芽生孢子形态 | 第35-36页 |
| ·Bb13-G1 工程菌株毒力的生物测定 | 第36-38页 |
| ·Bb1944-G1 工程菌株毒力的生物测定 | 第38-40页 |
| ·目的基因在菌株内的遗传稳定性验证 | 第40-41页 |
| 5 讨论 | 第41-42页 |
| 6 小结 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
