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猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、流行性乙型脑炎联合检测芯片的初步构建

中文摘要第1-6页
Abstract第6-8页
缩写说明第8-12页
文献综述第12-26页
 1 引言第12页
 2 三种猪繁殖障碍疾病及其诊断技术的研究进展第12-20页
   ·猪繁殖与呼吸综合征及其诊断技术研究进展第12-16页
     ·猪繁殖与呼吸综合征的概述第12-13页
       ·猪繁殖与呼吸综合征诊断技术研究进展第13-16页
   ·猪瘟及其诊断技术研究进展第16-18页
     ·猪瘟的概述第16-17页
     ·猪瘟诊断技术研究进展第17-18页
   ·流行性乙型脑炎及其诊断技术研究进展第18-20页
     ·流行性乙型脑炎的概述第18-19页
     ·流行性乙型脑炎诊断技术研究进展第19-20页
 3 基因芯片技术及其在猪病检测中的研究进展第20-25页
   ·基因芯片及其基本原理和技术流程第20-21页
     ·基因芯片及其基本原理第20页
     ·基因芯片技术流程第20-21页
   ·基因芯片技术在猪病中的检测应用第21-25页
     ·猪病毒性疾病的检测第22-23页
     ·猪细菌性疾病的检测第23-24页
     ·猪寄生虫疾病的检测第24-25页
 4. 研究目的及意义第25-26页
材料与方法第26-63页
 1 材料第26-27页
   ·病毒第26页
   ·重组质粒菌第26页
   ·主要试剂第26-27页
   ·主要仪器设备第27页
 2 试验方法第27-38页
   ·基因芯片靶基因及定位基因的质量控制第27-31页
     ·重组靶基因质粒菌的复苏与鉴定第27-28页
     ·靶基因、定位基因制备条件的初步确定第28-30页
     ·影响靶基因、定位基因质量因素的优化第30-31页
   ·基因芯片点制过程中条件的选择第31页
     ·点制芯片点样针的选择第31页
     ·点样缓冲液的选择第31页
     ·点样过程中湿度的优化第31页
   ·基因芯片的后处理方法条件的优化第31-33页
     ·芯片后处理方法条件初步建立第32页
     ·烘培时间的优化第32页
     ·水合时间的优化第32页
     ·紫外交联时间的优化第32-33页
   ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片的制备及质量控制第33-35页
     ·检测芯片矩阵的设计第33页
     ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片的制备第33-34页
     ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片同批检验第34-35页
   ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片的特异性、灵敏性及保存期实验第35-36页
     ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片特异性试验第35-36页
     ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片灵敏性试验第36页
     ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片保存期试验第36页
   ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片在临床诊断中的初步应用第36-38页
     ·样品的来源及处理第36-37页
     ·检测样品的标记第37-38页
     ·杂交检测第38页
 3 试验结果第38-56页
   ·靶基因、定位基因的质量控制第38-44页
     ·重组靶基因质粒菌复苏鉴定结果第38页
     ·定位基因扩增结果第38-39页
     ·靶基因、定位基因初步制备纯度和浓度测定结果第39页
     ·影响靶基因、定位基因质量因素的优化第39-44页
   ·基因芯片点制过程中条件的选择第44-46页
     ·基因芯片点样针的选择第44-45页
     ·点样缓冲液的选择第45页
     ·点样过程中湿度的选择第45-46页
   ·基因芯片后处理方法条件优化结果第46-49页
     ·烘焙时间优化结果第46-47页
     ·水合时间优化结果第47-48页
     ·紫外交联时间优化结果第48-49页
   ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片的制备及质量控制第49-50页
     ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片制备第49页
     ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片同批检验第49-50页
   ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片特异性、灵敏性保存期实验结果第50-52页
     ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片特异性试验结果第50-51页
     ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片灵敏性试验结果第51-52页
     ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片保存期试验结果第52页
   ·样品探针多重标记方法的建立第52-54页
     ·标记条件的优化结果第52-53页
     ·标记体系的确定第53-54页
   ·临床样品检测结果第54-56页
 4.讨论第56-62页
   ·基因芯片基片的选择第56页
   ·关于靶基因与探针的定义第56-57页
   ·靶基因制备第57-58页
   ·基因芯片点样过程中条件的控制及其后处理条件第58-59页
   ·样品探针标记方法第59页
   ·杂交检测及结果判定第59-60页
   ·PRRSV-CSFV-JEV基因芯片的特异性、灵敏性及保质期第60页
   ·样品检测第60-62页
 5 结论第62-63页
参考文献第63-71页
致谢第71-72页
附录一:基因芯片点样参数设置第72-75页
附录二:实验试剂的配置第75页

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