| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第1章 综述 | 第9-16页 |
| ·tRNA前体3’末端的加工 | 第10-12页 |
| ·tRNASE Z的结构与功能研究 | 第12-14页 |
| ·tRNase Z的两种类型 | 第12-13页 |
| ·tRNase Z结构和功能 | 第13-14页 |
| ·TRNASE Z与疾病的关系 | 第14页 |
| ·粟酒裂殖酵母是研究基因相互作用的理想模式生物 | 第14页 |
| ·裂殖酵母温度敏感型菌株及回复突变 | 第14-15页 |
| ·粟酒裂殖酵母全基因组测序方法 | 第15-16页 |
| 第二章 裂殖酵母trz1温度敏感菌株回复突变基因研究 | 第16-41页 |
| ·材料与方法 | 第16-29页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·培养基 | 第16-18页 |
| ·实验方法 | 第18-29页 |
| ·实验结果 | 第29-39页 |
| ·回复突变菌株trz1基因及上游启动子鉴定 | 第29-32页 |
| ·回复突变菌株全基因组测序及SNP基因救活实验结果 | 第32-33页 |
| ·回复突变菌株基因组测序结果 | 第33-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 抑制高表达Sptrz2~+致死表型的基因的筛选 | 第41-57页 |
| ·实验材料 | 第41-43页 |
| ·菌种及质粒 | 第41-43页 |
| ·培养基及储存液 | 第43页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-46页 |
| ·高表达trz2致死菌株的获得 | 第43页 |
| ·SPLE1文库质粒转化6381/4X-Sprtz2 | 第43-44页 |
| ·通过影印消耗维生素B1,使其表现出致死表型 | 第44页 |
| ·提取阳性转化子基因组,电转化获得能救活的文库质粒 | 第44-46页 |
| ·实验结果及分析 | 第46-55页 |
| ·影印后结果 | 第46-47页 |
| ·质粒酶切电泳图谱 | 第47页 |
| ·测序结果及分析 | 第47-50页 |
| ·Pm测序结果 | 第50-53页 |
| ·测序结果及酶切验证结果 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 检测已知的候选基因对温敏菌株的救活作用 | 第57-64页 |
| ·材料与方法 | 第57-60页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-60页 |
| ·结果 | 第60-62页 |
| ·yZZTS1的trz1基因存在额外的突变位点 | 第60页 |
| ·rex2和pnu1都无法救活yZZTS1 | 第60-61页 |
| ·yGW1的trz2突变位点的确在A623V | 第61-62页 |
| ·未发现转入的质粒能弥补trz2A623V温度敏感缺陷表型 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 附录一 主要仪器 | 第69-70页 |
| 附录二 本实验所用的酵母菌株 | 第70-71页 |
| 附录三 本实验所用的质粒 | 第71-73页 |
| 附录四 本实验所用的引物 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
