| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 缩略词(Abbrev i at i on) | 第12-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-25页 |
| ·副鸡禽杆菌的研究进展 | 第13-20页 |
| ·副鸡禽杆菌的简介 | 第13页 |
| ·病原学 | 第13-18页 |
| ·流行病学及发病机理 | 第18-19页 |
| ·疫苗防治 | 第19-20页 |
| ·体内诱导抗原技术(IVIAT)的原理与应用进展 | 第20-23页 |
| ·体内诱导抗原技术(IVIAT)的基本原理 | 第21页 |
| ·清探针的制备 | 第21页 |
| ·基因组表达文库的构建 | 第21页 |
| ·表达文库的筛选 | 第21页 |
| ·IVIAT的应用 | 第21-22页 |
| ·IVIAT的优点和不足 | 第22-23页 |
| ·突变株构建方法的研究进展 | 第23-25页 |
| ·转座子突变技术 | 第23-24页 |
| ·点突变技术 | 第24页 |
| ·同源重组技术 | 第24-25页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第25-26页 |
| 第3章 基因文库的构建与体内诱导抗原的筛选 | 第26-52页 |
| ·材料 | 第26-30页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·主要试剂和材料 | 第26页 |
| ·主要溶液 | 第26-30页 |
| ·引物合成 | 第30页 |
| ·实验仪器设备 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-41页 |
| ·血清探针的制备 | 第30-31页 |
| ·副鸡禽杆菌基因组表达文库的构建 | 第31-36页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的转化 | 第37页 |
| ·表达文库的筛选 | 第37-39页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第39页 |
| ·H18基因的克隆与表达 | 第39-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-49页 |
| ·副鸡禽杆菌基因组的PCR鉴定 | 第41页 |
| ·副鸡禽杆菌基因组DNA片段回收 | 第41-42页 |
| ·表达载体的制备 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第43-44页 |
| ·副鸡禽杆菌基因组表达文库大小计数 | 第44页 |
| ·基因文库的筛选与鉴定 | 第44-45页 |
| ·阳性克隆重组质粒的测序及分析 | 第45-47页 |
| ·H18L基因片段的PCR扩增 | 第47页 |
| ·重组质粒的构建 | 第47-48页 |
| ·荚膜蛋白的SDS-PAGE与Western-Blot检测 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| ·体内诱导的抗原技术(IVIAT) | 第49-50页 |
| ·构建副鸡禽杆菌基因组表达文库 | 第50页 |
| ·阳性克隆重组质粒的测序及分析 | 第50页 |
| ·H18L基因的克隆与表达 | 第50-52页 |
| 第4章 副鸡禽杆菌H18L基因缺失株的构建 | 第52-65页 |
| ·前言 | 第52页 |
| ·验材料和设备 | 第52页 |
| ·引物合成 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-59页 |
| ·基因缺失载体的构建与鉴定 | 第53-57页 |
| ·供体菌的构建 | 第57-58页 |
| ·β2155-pEM-ΔH18L供体菌的鉴定 | 第58页 |
| ·基因缺失载体的电转化 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-64页 |
| ·引物设计 | 第59-60页 |
| ·H18L基因片段的PCR扩增 | 第60页 |
| ·重组T载体的PCR鉴定 | 第60-61页 |
| ·重组T载体酶切鉴定 | 第61页 |
| ·目的基因的测序 | 第61页 |
| ·重组T载体的反向PCR | 第61-62页 |
| ·缺失载体PCR鉴定 | 第62页 |
| ·缺失载体的酶切鉴定 | 第62-63页 |
| ·自杀质粒pEMOC-2的酶切 | 第63-64页 |
| ·供体菌的构建 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第73页 |