小鼠先天性白内障新型自发突变基因的定位克隆
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-23页 |
| ·研究意义 | 第12页 |
| ·白内障研究进展 | 第12-20页 |
| ·白内障形成机理 | 第12-13页 |
| ·白内障相关基因的研究进展 | 第13-15页 |
| ·白内障基因的突变方式 | 第15-20页 |
| ·立题背景 | 第20-21页 |
| ·白内障小鼠的来源 | 第20页 |
| ·白内障治病基因的定位克隆策略 | 第20-21页 |
| ·全基因组STR位标扫描实验原理 | 第21页 |
| ·双脱氧链终止法测定DNA序列原理 | 第21页 |
| ·研究思路 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-40页 |
| ·材料 | 第23-26页 |
| ·实验群体 | 第23页 |
| ·仪器和试剂 | 第23-26页 |
| ·方法 | 第26-39页 |
| ·遗传方式验证 | 第26页 |
| ·动物模型的构建 | 第26页 |
| ·白内障病理切片的制作 | 第26页 |
| ·小鼠基因组DNA抽提 | 第26-27页 |
| ·全基因组扫描所用F2代小鼠和marker的选择 | 第27页 |
| ·全基因组扫描和精细定位所用STR的选取 | 第27-29页 |
| ·全基因组扫描和精细定位STR的分型方案 | 第29-36页 |
| ·STR片段的凝胶电泳检测 | 第36页 |
| ·目标基因的cDNA测序 | 第36-37页 |
| ·突变位点检测 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR半定量 | 第38-39页 |
| ·生物信息学分析 | 第39页 |
| ·统计学分析 | 第39-40页 |
| ·突变小鼠的连锁分析 | 第39-40页 |
| 第三章 结果与分析 | 第40-56页 |
| ·遗传方式验证结果 | 第40页 |
| ·白内障形态学分析结果 | 第40-43页 |
| ·前囊和前囊下浅层皮质 | 第41页 |
| ·赤道部 | 第41页 |
| ·核心部 | 第41-42页 |
| ·后囊及后囊下皮质 | 第42-43页 |
| ·基因组DNA抽提结果 | 第43-44页 |
| ·全基因组扫描和精细定位的STR分型结果 | 第44-46页 |
| ·单倍型分析结果 | 第46-47页 |
| ·候选基因的cDNA测序结果 | 第47-49页 |
| ·突变位点验证结果 | 第49页 |
| ·RT-PCR半定量结果 | 第49-50页 |
| ·RNA抽提结果 | 第49-50页 |
| ·RT-PCR半定量结果 | 第50页 |
| ·生物信息学分析结果 | 第50-56页 |
| ·理化性质分析 | 第50-51页 |
| ·疏水性分析 | 第51页 |
| ·跨膜结构分析 | 第51-52页 |
| ·蛋白质结构域与功能分析 | 第52-54页 |
| ·蛋白质三维结构分析 | 第54-56页 |
| 第四章 讨论 | 第56-60页 |
| ·突变基因的遗传方式与同源基因导入同类系 | 第56页 |
| ·形态学、组织学分析 | 第56-57页 |
| ·基因定位结果 | 第57页 |
| ·突变位点验证 | 第57-58页 |
| ·生物化学特性分析 | 第58页 |
| ·Crygc基因对于晶状体发育的重要性 | 第58-60页 |
| 第五章 结论与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 课题来源 | 第67-68页 |
| 上海市科学技术委员会(09140901100) | 第67-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文目录 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
