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普通小麦籽粒多酚氧化酶及黄色素含量相关基因克隆与表达机理分析

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 文献综述第15-30页
   ·面粉及面制品颜色形成原因及影响因素第15-16页
   ·植物多酚氧化酶研究进展第16-21页
     ·PPO蛋白和细胞定位第16-17页
     ·PPO生理生化功能第17-18页
     ·PPO基因的克隆第18-19页
     ·小麦籽粒PPO第19-21页
   ·植物类胡萝卜素研究进展第21-27页
     ·植物类胡萝卜素的合成与代谢途径第21-24页
     ·小麦黄色素含量及相关基因研究第24-27页
   ·植物选择性剪接机制研究进展第27-28页
   ·研究目的和意义第28-30页
第二章 普通小麦籽粒多酚氧化酶基因克隆第30-42页
   ·实验材料第30-31页
   ·实验方法第31-33页
     ·总DNA提取方法第31页
     ·普通小麦2B染色体上PPO基因克隆及多态性分析第31-32页
     ·利用PCR方法筛选普通小麦基因组BAC文库第32页
     ·BAC质粒DNA提取纯化第32页
     ·亚克隆文库构建和PPO基因筛选第32-33页
   ·结果与分析第33-39页
     ·普通小麦2B染色体PPO基因等位变异第33-35页
     ·利用PCR方法筛选基因组BAC文库克隆PPO基因第35-37页
     ·亚克隆文库构建与Ppo1基因的克隆第37-39页
   ·讨论第39-42页
     ·普通小麦2B染色体PPO基因多态性分析第39-40页
     ·利用PCR方法筛选基因组BAC文库第40页
     ·普通小麦PPO基因的启动子和3'UTR序列第40-41页
     ·禾本科植物的PPO基因第41-42页
第三章 普通小麦2A和2D染色体PPO基因的表达机理第42-57页
   ·实验材料第42-43页
   ·实验方法第43-45页
     ·总RNA提取与纯化第43页
     ·半定量RT-PCR第43页
     ·籽粒PPO蛋白提取及活性检测第43-44页
     ·Ppo-A1基因在大肠杆菌中重组表达第44页
     ·Ppo-A1基因表达蛋白Western Blotting第44-45页
   ·结果与分析第45-53页
     ·籽粒发育中PPO活性及L-DOPA染色密度分析第45-47页
     ·Ppo-A1基因转录水平表达与选择性剪接第47-50页
     ·Ppo-A1基因组织特异性表达第50页
     ·Ppo-D1基因转录水平表达分析第50-51页
     ·籽粒PPO基因原核表达与蛋白印迹分析第51-53页
   ·讨论第53-57页
     ·第一内含子191 bp InDel对普通小麦籽粒PPO活性的影响第53-54页
     ·选择性剪接转录本与无义介导的mRNA降解机制第54页
     ·前体mRNA第一内含子二级结构与RNA剪接第54-55页
     ·Ppo-A1b基因选择性剪接是稳定表达的分子机制第55-56页
     ·Ppo-D1基因转录表达水平与籽粒PPO活性第56页
     ·籽粒PPO基因翻译水平表达模式第56-57页
第四章 普通小麦Psy1基因克隆与Psy-A1基因表达第57-66页
   ·实验材料第57-58页
   ·实验方法第58页
     ·利用PCR方法筛选普通小麦基因组BAC文库第58页
     ·BAC质粒DNA提取纯化第58页
     ·亚克隆文库构建和PSY基因筛选第58页
     ·总RNA提取和RT-PCR第58页
   ·结果与分析第58-64页
     ·利用PCR方法筛选基因组BAC文库克隆PSY基因第58-61页
     ·亚克隆文库构建与PSY基因筛选第61-63页
     ·Psy-A1基因转录水平表达分析第63-64页
   ·讨论第64-66页
     ·利用PCR方法筛选小偃54基因组BAC文库Psyl基因第64页
     ·Psy-A1转录水平基因表达模式第64-66页
第五章 普通小麦Z-ISO基因的克隆与多态性分析第66-75页
   ·实验材料第66页
   ·实验方法第66-67页
     ·普通小麦Z-ISO基因的克隆第66-67页
     ·普通小麦Z-ISO基因序列多态性发掘第67页
   ·结果与分析第67-73页
     ·中国春小麦Z-ISO基因的克隆与染色体定位第67-71页
     ·普通小麦Z-ISO等位基因多态性分析第71-73页
   ·讨论第73-75页
     ·全长Z-ISO基因序列的克隆第73页
     ·普通小麦Z-ISO基因的序列多态性第73-75页
第六章 全文结论第75-77页
   ·利用PCR方法筛选小偃54基因组BAC文库克隆PPO基因第75页
   ·普通小麦籽粒发育过程中PPO基因表达模式与选择性剪接机制第75页
   ·利用PCR方法筛选小偃54基因组BAC文库克隆PSY基因第75-76页
   ·普通小麦Psy-A1转录水平基因表达模式第76页
   ·普通小麦Z-ISO基因的克隆与序列多态性分析第76-77页
参考文献第77-89页
致谢第89-90页
作者简历第90页

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