| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-21页 |
| ·抗菌肽的研究 | 第11-19页 |
| ·分类 | 第11-12页 |
| ·生物活性 | 第12-13页 |
| ·应用 | 第13-14页 |
| ·国内外研究现状 | 第14-17页 |
| ·问题 | 第17-18页 |
| ·展望 | 第18-19页 |
| ·蛇毒抗菌肽 | 第19页 |
| ·本文的研究内容与意义 | 第19-21页 |
| ·本文的研究内容 | 第19-20页 |
| ·本文的研究意义 | 第20-21页 |
| 第二章 抗菌肽G13结构域高效表达策略及活性的研究 | 第21-43页 |
| ·材料 | 第21-25页 |
| ·仪器 | 第21-22页 |
| ·载体与菌株 | 第22-23页 |
| ·试剂及配制 | 第23-25页 |
| ·方法 | 第25-32页 |
| ·重组质粒的构建和鉴定 | 第25-27页 |
| ·重组质粒突变体的构建 | 第27-29页 |
| ·重组质粒及其突变体的诱导表达 | 第29-30页 |
| ·共表达菌株的诱导表达 | 第30页 |
| ·重组蛋白G13的制备及抑菌活性检测 | 第30页 |
| ·重组蛋白G13结构域的浓度测定 | 第30-31页 |
| ·重组蛋白G13结构域的溶血活性 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-40页 |
| ·重组质粒的构建 | 第32页 |
| ·重组质粒突变体的构建 | 第32页 |
| ·G13结构域在pBAD/TOPO和pThiohisA中表达结果分析 | 第32-34页 |
| ·G13结构域在pET28a中的表达 | 第34-35页 |
| ·共表达菌株的诱导表达 | 第35-37页 |
| ·重组G13结构域的制备及抑菌活性检测 | 第37页 |
| ·重组G13结构域的浓度测定 | 第37-38页 |
| ·重组G13结构域的溶血活性 | 第38-40页 |
| ·讨论 | 第40-43页 |
| 第三章 蛇毒抗菌肽Vgf-1的表达及活性的初步研究 | 第43-58页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·仪器 | 第43页 |
| ·菌株与载体 | 第43页 |
| ·试剂及配制 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-50页 |
| ·Vgf-1基因的克隆 | 第44-45页 |
| ·重组质粒的构建 | 第45-46页 |
| ·基因工程菌的诱导表达及融合蛋白的可溶性分析 | 第46-47页 |
| ·融合蛋白的含量测定 | 第47页 |
| ·融合蛋白的肠激酶切割 | 第47-48页 |
| ·融合蛋白的复性 | 第48页 |
| ·蛋白活性的初步测定 | 第48-50页 |
| ·蛋白复性的优化 | 第50页 |
| ·结果 | 第50-55页 |
| ·Vgf-1基因的克隆 | 第50-51页 |
| ·重组质粒的构建 | 第51-52页 |
| ·基因工程菌的诱导表达及融合蛋白的可溶性分析 | 第52-53页 |
| ·融合蛋白的含量测定 | 第53-54页 |
| ·融合蛋白的肠激酶切割 | 第54页 |
| ·蛋白复性及活性的初步测定 | 第54页 |
| ·蛋白复性的优化 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 第四章 总结与展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第65-66页 |