| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-53页 |
| 1 金荞麦研究进展 | 第17-29页 |
| ·金荞麦的种属关系及植物分类 | 第17-20页 |
| ·种属关系 | 第17-18页 |
| ·植物分类 | 第18-20页 |
| ·金荞麦的分布和生态坏境 | 第20-21页 |
| ·金荞麦的分布 | 第20页 |
| ·金荞麦的生态环境 | 第20-21页 |
| ·金荞麦化学及有效成分研究 | 第21-23页 |
| ·金荞麦的药理作用与临床引用 | 第23-26页 |
| ·性味及功能 | 第23页 |
| ·药理作用 | 第23-26页 |
| ·临床应用 | 第26页 |
| ·金荞麦的栽培引种及组织培养 | 第26-28页 |
| ·金荞麦开发与利用 | 第28页 |
| ·展望 | 第28-29页 |
| 2 植物类黄酮的生物学功能及其应用研究进展 | 第29-34页 |
| ·类黄酮的基本结构及分类 | 第29-30页 |
| ·类黄酮在植物生长发育中的功能 | 第30-31页 |
| ·类黄酮决定植物花色 | 第30页 |
| ·类黄酮与植物花粉育性的关系 | 第30-31页 |
| ·类黄酮与植物抗菌、抗病的关系 | 第31页 |
| ·新观点-类黄酮作为细胞信号分子 | 第31页 |
| ·类黄酮的药理作用及其在医药方面的应用 | 第31-34页 |
| ·类黄酮的抗氧化及清除自由基活性 | 第31-32页 |
| ·类黄酮的防癌、抗癌功能研究 | 第32-33页 |
| ·类黄酮与心血管疾病 | 第33页 |
| ·类黄酮抗菌抗病毒功能 | 第33-34页 |
| ·类黄酮的免疫调节功能 | 第34页 |
| ·荞麦属类黄酮研究现状 | 第34页 |
| 3 植物类黄酮生物合成途径及重要基因的调控 | 第34-53页 |
| ·植物类黄酮主要的生物合成途径及影响因素 | 第35-38页 |
| ·植物类黄酮的生物合成途径 | 第35-37页 |
| ·影响类黄酮生物合成的因素 | 第37-38页 |
| ·植物类黄酮生物合成途径中的关键酶基因及调控基因 | 第38-49页 |
| ·类黄酮生物合成途径中的结构基因 | 第38-46页 |
| ·类黄酮生物合成途径中的转录调控因子 | 第46-49页 |
| ·植物类黄酮次生代谢调控及生物工程研究进展 | 第49-50页 |
| ·展望 | 第50-53页 |
| 第2章 引言 | 第53-55页 |
| ·研究背景 | 第53页 |
| ·研究的意义及目的 | 第53-54页 |
| ·技术路线 | 第54-55页 |
| 第3章 金荞麦无色花色素还原酶基因(FdLAR)的克隆及功能初步分析 | 第55-101页 |
| ·材料 | 第55-58页 |
| ·植物材料 | 第55页 |
| ·菌株与载体 | 第55页 |
| ·试剂盒及主要试剂 | 第55-56页 |
| ·主要仪器和设备 | 第56页 |
| ·自配的主要试剂 | 第56-57页 |
| ·烟草转化基本培养基 | 第57-58页 |
| ·GUS染液的配制 | 第58页 |
| ·常规方法介绍 | 第58-63页 |
| ·RNA的提取 | 第58-59页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第59页 |
| ·RNA的质量检测 | 第59页 |
| ·植物基因组DNA的提取 | 第59-60页 |
| ·DNA质量的检测 | 第60页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳后目标DNA片段的回收 | 第60-61页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第61页 |
| ·连接反应 | 第61-62页 |
| ·CaCl_2法制备大肠杆菌TOP10/Rossta感受态细胞 | 第62页 |
| ·连接产物或重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第62页 |
| ·农杆菌GV3103电转化感受态的制备 | 第62-63页 |
| ·电击法转化农杆菌GV3103感受态细胞 | 第63页 |
| ·重组子的鉴定、测序 | 第63页 |
| ·具体方法及步骤 | 第63-79页 |
| ·从金荞麦混合样总RNA合成第一链cDNA | 第63-65页 |
| ·金荞麦FdLAR基因的克隆 | 第65-68页 |
| ·金荞麦FdLAR基因的生物信息学分析 | 第68-69页 |
| ·金荞麦FdLAR基因在大肠杆菌中的表达及功能验证 | 第69-74页 |
| ·FdLAR基因转化烟草的功能验证 | 第74-79页 |
| ·结果与分析 | 第79-98页 |
| ·金荞麦FdLAR基因的克隆 | 第79-82页 |
| ·金荞麦FdLAR基因编码蛋白同源性 | 第82-85页 |
| ·金荞麦FdLAR基因编码蛋白性质与结构分析 | 第85-88页 |
| ·金荞麦FdLAR基因原核表达载体的构建 | 第88-89页 |
| ·金荞麦FdLAR重组蛋白的获得和纯化 | 第89-91页 |
| ·金荞麦FdLAR重组蛋白的酶活测定 | 第91-93页 |
| ·金荞麦FdLAR基因植物表达载体的构建 | 第93-94页 |
| ·转FdLAR基因烟草的获得及检测 | 第94-97页 |
| ·FdLAR基因在转基因烟草中的荧光定量表达分析及类黄酮含量测定 | 第97-98页 |
| ·小结与讨论 | 第98-100页 |
| ·展望 | 第100-101页 |
| 第4章 金荞麦二氢黄酮醇-4-还原酶基因(FdDFR)、查尔酮合成酶基因(FdCHS)的克隆与功能初步分析 | 第101-117页 |
| ·材料与方法 | 第101-104页 |
| ·金荞麦总RNA的提取及质量检测；DNA的连接、转化及测序 | 第101页 |
| ·从金荞麦混合样总RNA合成第一链cDNA | 第101页 |
| ·金荞麦二氢黄酮醇-4-还原酶基因(FdDFR)、查尔酮合成酶基因(FdCHS)的克隆 | 第101-102页 |
| ·FdDFR基因原核表达载体的构建 | 第102页 |
| ·FdDFR重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第102页 |
| ·FdDFR重组蛋白的酶活测定 | 第102页 |
| ·FdCHS基因原核表达载体的构建 | 第102-103页 |
| ·FdCHS重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第103页 |
| ·FdCHS重组蛋白的酶活测定 | 第103页 |
| ·FdCHS基因植物表达载体的构建 | 第103页 |
| ·FdCHS基因转化烟草的功能验证 | 第103-104页 |
| ·结果与分析 | 第104-114页 |
| ·金荞麦FdDFR基因和FdCHS的克隆 | 第104-105页 |
| ·FdDFR基因原核表达载体的构建 | 第105页 |
| ·FdDFR重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第105-106页 |
| ·FdDFR重组蛋白的酶活测定 | 第106-107页 |
| ·FdCHS基因原核表达载体的构建 | 第107页 |
| ·FdCHS重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第107-108页 |
| ·FdCHS重组蛋白的酶活测定 | 第108-110页 |
| ·FdCHS基因植物表达载体的构建 | 第110-111页 |
| ·转FdCHS基因烟草的获得及检测 | 第111-113页 |
| ·FdCHS基因在转基因烟草中的荧光定量表达分析及类黄酮含量测定 | 第113-114页 |
| ·小结与讨论 | 第114-115页 |
| ·展望 | 第115-117页 |
| 第5章 金荞麦类黄酮的生物合成与金荞麦FdCHS、FdDFR、FdLAR及FdMYBP1基因表达特征分析 | 第117-131页 |
| ·材料与方法 | 第117-120页 |
| ·金荞麦不同发育阶段各组织中类黄酮含量的测定 | 第117页 |
| ·金荞麦花期各个组织中DFR/LAR酶的提取及酶活测定 | 第117页 |
| ·FdCHS、FdDFR、FdLAR、FdMYBP1基因在金荞麦发育不同阶段各个组织中表达的荧光定量PCR检测 | 第117-120页 |
| ·结果与分析 | 第120-128页 |
| ·金荞麦各部位组织总RNA的提取 | 第120-121页 |
| ·金荞麦不同发育阶段各组织中类黄酮含量的测定 | 第121-122页 |
| ·FdCHS、FdDFR、FdLAR和FdMYBP1基因在金荞麦发育不同阶段各个组织中表达的荧光定量PCR检测 | 第122-128页 |
| ·小结与讨论 | 第128-129页 |
| ·展望 | 第129-131页 |
| 第6章 总结 | 第131-133页 |
| ·主要结论 | 第131-132页 |
| ·主要创新点 | 第132页 |
| ·下一步研究构想 | 第132-133页 |
| 参考文献 | 第133-157页 |
| 附录1 缩略词 | 第157-159页 |
| 附录2 学习期间发表的论文和参加的科研项目 | 第159-161页 |
| 致谢 | 第161-163页 |
